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sífilis é uma doença sexualmente transmissível causada por infecção pelo espiroqueta Treponema pallidum. Devido a uma incapacidade de rotineiramente cultura do agente infeccioso, o diagnóstico da infecção por sífilis é feito principalmente por uma combinação de apresentação clínica e serologia. Este teste serológico pode ser dividido em dois tipos de testes: testes treponemais que testam anticorpos dirigidos contra T. testes de pallidum e não-reponema que medem os Anticorpos anticardiolipina produzidos durante a infecção activa.

nos últimos anos, muitos laboratórios mudaram para o rastreio de doentes com um ensaio treponemal e, em seguida, reformularam amostras positivas para o teste não reponemal, uma prática que inverte a abordagem histórica. Há um debate em curso na literatura sobre os méritos relativos dos algoritmos. Enquanto uma parte da discussão se concentra na relevância clínica da identificação de anticorpos treponemais em pacientes assintomáticos e na relação custo-eficácia de diferentes algoritmos de triagem (4, 8, 9), uma preocupação adicional é o desempenho analítico dos testes treponemais disponíveis no mercado (10). Embora os estudos iniciais sugiram que a taxa de resultados analíticos falsos-positivos foi relativamente baixa quando se utilizaram testes de anticorpos treponemais para rastreio (3), um estudo mais recente identificou uma maior frequência de resultados positivos não confirmados (2). No entanto, estes resultados são um pouco difíceis de interpretar, uma vez que foram utilizadas várias combinações diferentes de testes de rastreio e de confirmação. Embora muitos estudos tenham comparado as características de desempenho de vários ensaios treponemais comercializados (1, 5, 7) uma limitação é que os resultados da serologia treponemal são geralmente considerados como representando uma variável binária (isto é, “reativa” versus “não reativa”) ao invés de um contínuo. Para resolver isso, examinamos se os resultados semiquantitativos fornecem informações adicionais relevantes para determinar o estado serológico de um paciente.

as Amostras foram analisadas para a presença de treponemal anticorpos pelo uso de dois imunoensaios: o Bioplex 2200 sífilis IgG (SYPHG) (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA) e o Trep-Certeza de ensaio (Phoenix Biotecnologia Corp., Oakville, Ontário, Canadá). O ensaio com Bioplex SYPHG é um imunoensaio multiplex baseado em bead que utiliza antigénios treponemais recombinantes (Tp15, Tp17 e Tp47) como reagente de captura, seguido de detecção com um conjugado IGG-phycoerythrina (PE) murina anti-humano (6). Os resultados são expressos como um” índice de anticorpos ” (AI), que é uma unidade arbitrária relacionada com a relação entre o sinal da amostra e os limites definidos pelo calibrador. Trep-Sure é um imunoensaio enzimático baseado em microplacas (EIA) que também usa antigénios treponemais recombinantes (em uma mistura proprietária) como reagente de captura, mas utiliza antigénios treponemais conjugados com peroxidase para detecção (11). A medição dos anticorpos não-reponemais foi realizada por testes rápidos de reagina plasmática (RPR) (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ).amostras de estudo foram selecionadas de amostras enviadas para o nosso laboratório para testes de sífilis de rotina e analisadas sem conhecimento de histórias clínicas. Alíquotas de amostras que foram reativas na triagem Bioplex inicial SYPHG foram testadas pela EIA Trep-Sure e RPR. Nosso laboratório atende a uma população de baixa prevalência, com uma taxa inicial screen-positive de aproximadamente 3% com base em dados históricos (dados não mostrados).

um total de 142 amostras que foram identificadas como reactivas no ensaio de rastreio Bioplexo inicial foram submetidas a testes de reflexo, tal como acima descrito. A presença de anticorpos treponemais foi confirmada pela AIA Trep-Sure em 77% (110/142) das amostras, uma taxa semelhante à relatada em estudos multicêntricos anteriores (3). No entanto, a probabilidade de confirmação foi altamente dependente tanto do estado RPR do doente como do valor SYPHG determinado no ensaio de rastreio Bioplex (Fig. 1). O estado de anticorpos treponemais foi confirmado pela AIA para todas as amostras RPR positivas (n = 27), independentemente do valor inicial da SIFG. Em contraste, os resultados discordantes foram determinados para 28% (32/115) dos pacientes negativos em RPR, com uma frequência crescente em amostras com baixos valores de SYPHG na triagem inicial. A análise da característica operacional do receptor (ROC) foi realizada para identificar um valor de corte que proporcionaria um alto nível de especificidade para a identificação de amostras “verdadeiras positivas” (confirmadas por EIA) (Fig. 2). Foi selecionado um valor de IA de corte de 6,0, proporcionando 100% de especificidade (intervalo de confiança , 89,3 a 100,0%). Todas as amostras com rastreio SYPHG valores acima deste nível (78/78) foram confirmadas pela AIA, em comparação com apenas 50% (32/64) das amostras com rastreio SYPHG níveis < 6.0 AI (P < 0.0001 ).comparação dos resultados de anticorpos treponemais. Um total de 142 amostras foram testadas para pesquisa de anticorpos treponemais pelo uso tanto dos ensaios Bioplex e Trep-Sure (EIA), como para reatividade RPR. Os resultados são categorizados pelo valor SYPHG detectado no ensaio inicial de rastreio Bioplex.