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La syphilis est une maladie sexuellement transmissible causée par une infection par le spirochète Treponema pallidum. En raison de l’incapacité de cultiver régulièrement l’agent infectieux, le diagnostic de l’infection par la syphilis se fait principalement par une combinaison de présentation clinique et de sérologie. Ce test sérologique peut être divisé en deux types de tests: les tests tréponémiques qui testent les anticorps dirigés contre T. tests de pallidum et non déponémaux qui mesurent les anticorps anti-cardiolipines produits lors d’une infection active.

Au cours des dernières années, de nombreux laboratoires se sont tournés vers le dépistage des patients avec un test tréponémique, puis vers des tests non déponémiques, une pratique qui inverse l’approche historique. Il y a un débat en cours dans la littérature sur les mérites relatifs des algorithmes. Alors qu’une partie de la discussion se concentre sur la pertinence clinique de l’identification des anticorps tréponémiques chez les patients asymptomatiques et la rentabilité des différents algorithmes de dépistage (4, 8, 9), une préoccupation supplémentaire est la performance analytique des tests tréponémiques disponibles sur le marché (10). Bien que des études initiales aient suggéré que le taux de résultats faussement positifs analytiques était relativement faible lors de l’utilisation de tests d’anticorps tréponémiques pour le dépistage (3), une enquête plus récente a identifié une fréquence plus élevée de résultats positifs non confirmés (2). Cependant, ces résultats sont quelque peu difficiles à interpréter, car plusieurs combinaisons différentes de tests de dépistage et de confirmation ont été utilisées. Bien que de nombreuses études aient comparé les caractéristiques de performance de divers tests tréponémiques commercialisés (1, 5, 7), une limitation est que les résultats de la sérologie tréponémique sont généralement considérés comme représentant une variable binaire (c.-à-d. « réactive” versus « non réactive”) plutôt qu’une variable continue. Pour résoudre ce problème, nous avons examiné si les résultats semi-quantitatifs fournissaient des informations supplémentaires pertinentes pour déterminer l’état sérologique d’un patient.

Des échantillons ont été analysés pour la présence d’anticorps tréponémiques à l’aide de deux immunoessais: le dosage des IgG de syphilis Bioplex 2200 (SYPHG) (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA) et le dosage Trep-Sure (Phoenix BioTech Corp., Oakville, Ontario, Canada). Le dosage Bioplex SYPHG est un immunoessai multiplex à base de billes qui utilise des antigènes tréponémiques recombinants (Tp15, Tp17 et Tp47) comme réactif de capture, suivi d’une détection avec un conjugué IgG-phycoérythrine (PE) anti-humain murin (6). Les résultats sont exprimés sous la forme d’un « indice d’anticorps” (AI), qui est une unité arbitraire liée au rapport entre le signal d’échantillon et les seuils définis par le calibreur. Trep-Sure est un dosage immuno-enzymatique (EIA) à base de microplaques qui utilise également des antigènes tréponémiques recombinants (dans un mélange exclusif) comme réactif de capture, mais utilise des antigènes tréponémiques conjugués à la peroxydase pour la détection (11). La mesure des anticorps non déponémaux a été effectuée par test rapide de la réactif plasmatique (RPR) (Becton Dickinson, Franklin Lakes, New Jersey).

Les échantillons de l’étude ont été sélectionnés à partir d’échantillons envoyés à notre laboratoire pour des tests de syphilis de routine et analysés sans connaissance des antécédents cliniques. Des aliquotes provenant d’échantillons réactifs lors du criblage initial des SYPHG Bioplex ont été testées par l’EIE trépidante et le RPR. Notre laboratoire dessert une population à faible prévalence, avec un taux initial de dépistage positif d’environ 3% sur la base de données historiques (données non présentées).

Au total, 142 échantillons identifiés comme réactifs lors de l’essai de dépistage initial du Bioplex ont subi un test réflexe tel que décrit ci-dessus. La présence d’anticorps tréponémiques a été confirmée par l’EIA tréponémique dans 77% (110/142) des échantillons, un taux similaire à celui rapporté dans des études multicentriques antérieures (3). Cependant, la probabilité de confirmation dépendait fortement à la fois de l’état RPR du patient et de la valeur SYPHG déterminée dans le test de dépistage Bioplex (Fig. 1). Le statut des anticorps tréponémiques a été confirmé par EIA pour tous les échantillons RPR positifs (n = 27), quelle que soit la valeur initiale de SYPHG. En revanche, des résultats discordants ont été déterminés pour 28% (32/115) des patients RPR-négatifs, avec une fréquence croissante dans les échantillons avec de faibles valeurs de SYPHG lors du dépistage initial. Une analyse des caractéristiques de fonctionnement du récepteur (ROC) a été effectuée pour identifier une valeur de coupure qui fournirait un niveau élevé de spécificité pour l’identification d’échantillons  » vrais positifs” (confirmés par l’EIE) (Fig. 2). Une valeur AI de coupure de 6,0, fournissant une spécificité de 100% (intervalle de confiance, 89,3 à 100,0%), a été sélectionnée. Tous les échantillons avec des valeurs de SYPHG de dépistage supérieures à ce niveau (78/78) ont été confirmés par l’EIA contre seulement 50% (32/64) des échantillons avec des niveaux de SYPHG de dépistage < 6,0 AI (P < 0,0001).

Pour s’assurer que cette disparité n’était pas due à des différences de sensibilité analytique entre les tests Bioplex et Trep-Sure, cinq échantillons fortement positifs (résultats SYPHG de > 8,0 AI) ont été dilués avec du sérum normal pour obtenir des valeurs comprises entre 1,0 et 2,0 AI dans le test Bioplex. Ces cinq échantillons dilués ont tous donné des résultats positifs dans le test Trep-Sure, démontrant que ce test de confirmation était capable de détecter des anticorps tréponémiques à ces concentrations plus faibles. Cela était conforme aux résultats observés dans les échantillons RPR positifs, où plusieurs échantillons faiblement positifs ont néanmoins été confirmés par l’EIE.

Il peut être difficile de déterminer la pertinence d’un résultat positif en anticorps tréponémaux pour un patient présentant une RRP négative, en particulier en l’absence d’antécédents cliniques clairs. Pour cette raison, il est essentiel d’identifier et de minimiser les résultats faussement positifs analytiques. Dans ce rapport, nous démontrons que la valeur SYPHG peut aider à éclairer cette décision et peut être utilisée lors de l’élaboration d’une stratégie de test réflexe. Bien que le test de dépistage utilisé dans cette étude n’ait pas été approuvé par la FDA en tant qu’essai quantitatif, ces données suggèrent que le résultat semi-quantitatif de l’IA peut toujours fournir des informations utiles liées à la nécessité d’un test de confirmation. Sur la base de ces données, nous proposons l’algorithme suivant pour le dépistage de la syphilis dans notre établissement. Tous les échantillons qui sont réactifs dans le test de dépistage initial du SYPHG sont testés par RPR. Les échantillons RPR-positifs ne nécessitent aucun autre test, indépendamment de l’IA initiale dans le test SYPHG. En revanche, les tests RPR-négatifs avec des résultats SYPHG initiaux de < 6.0 sont automatiquement soumis à une EIE de confirmation. Cet algorithme limite le test d’EIA réflexe à environ 1% des échantillons envoyés pour le test de syphilis, mais se concentre sur les échantillons les plus susceptibles d’avoir des résultats discordants.

Une limitation est que, en raison d’un manque de normalisation des dosages tréponémiques de différents fabricants, les valeurs spécifiques de SYPHG AI identifiées dans cette étude ne s’appliquent qu’aux cas où le dépistage initial est effectué à l’aide du dosage Bioplex. Cependant, l’approche démontrée ici peut être facilement évaluée pour d’autres tests afin de déterminer la valeur de coupure idéale pour déclencher le test réflexe. Un point important est que, lorsque le test de confirmation est mis en œuvre, il doit être effectué à l’aide d’un test présentant une sensibilité analytique pour détecter de faibles concentrations d’anticorps tréponémiques égales ou supérieures à celle du test de dépistage. Une analyse systématique des sensibilités analytiques relatives des tests tréponémiques actuels serait un outil précieux pour aider les laboratoires à établir des algorithmes de test appropriés.

La détermination des avantages relatifs de l’utilisation de tests tréponémiques par rapport à des tests non déponémiques pour évaluer l’infection de la syphilis chez les patients nécessite une étude plus approfondie. Cependant, quelle que soit la méthode, les laboratoires devraient élaborer des approches pour identifier les résultats faussement positifs analytiques dans la mesure du possible. Comprendre les caractéristiques de performance analytique des tests tréponémiques, ainsi que l’établissement de seuils spécifiques aux tests pour déclencher des tests de confirmation, est une approche qui peut être utilisée pour aider à cet égard, en particulier lors du dépistage des populations à faible prévalence.