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梅毒は、spirochete Treponema pallidumの感染によって引き起こされる性感染症です。 感染性病原体を日常的に培養することができないため、梅毒感染の診断は、主に臨床的提示と血清学の組み合わせによって行われる。 この血清学的検査は、大きく2つのタイプのアッセイに分けることができます：tに対する抗体を検査するトレポネマル検査。 活動的な伝染の間に作り出されるanticardiolipinの抗体を測定するpallidumおよびnontreponemalテスト。
近年、多くの実験室はtreponemal試金の患者を選別し、次にnontreponemalテスト、歴史的なアプローチを逆転させる練習に肯定的なサンプルをreflexingに移しました。 アルゴリズムの相対的なメリットについての文献で進行中の議論があります。 議論の一部は、無症候性患者におけるトレポネマル抗体の同定と異なるスクリーニングアルゴリズムの費用対効果（4、8、9）の臨床的関連性に焦点を当て 初期の研究では、スクリーニングのためにトレポネマル抗体検査を使用した場合、分析的な偽陽性結果の割合は比較的低いことが示唆されたが（3）、より最近の調査では、未確認の陽性結果の頻度が高いことが確認された（2）。 しかし、スクリーニング検査と確認検査のいくつかの異なる組み合わせが使用されたため、これらの結果は解釈するのがやや困難である。 多くの調査がさまざまな市販されたtreponemal試金（1、5、7）のパフォーマンス特性を比較した間、1つの限定はtreponemal血清学の結果が通常二値変数（すなわち、”反応”対”nonreactive”） これに対処するために、我々は、半定量的結果は、患者の血清学的状態を決定することに関連する追加情報を提供するかどうかを検討した。２つの免疫アッセイ：Ｂｉｏｐｌｅｘ２ ２ ０ ０ｓｙｐｈｉｌｉｓ Ｉｇｇアッセイ（ＳＹＰＨＧ）（Ｂｉｏ−Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，Ｃ Ａ）およびＴｒｅｐ−Ｓｕｒアッセイ（Ｐｈｅｎｉｘ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｃｏｒｐ．，Ｏａｋｖｉｌｌｅ，Ｏｎｔａｒｉｏ，Ｃａｎａｄａ）の使用により、トレポネマル抗体の存在について試料を分析した。 Bioplex SYPHGの試金は捕獲の試薬として組換えのtreponemal抗原（Tp15、Tp17およびTp47）を使用するマウスの反人間のIgG-phycoerythrin（PE）の共役との検出に先行しているビードベースの多重 結果は、「抗体指数」（Ａ Ｉ）として表され、これは、較正器が定義したカットオフに対する試料信号の比に関連する任意の単位である。 Trep-Sureはまた捕獲の試薬として組換えのtreponemal抗原を（専有混合物で）使用するが、検出のためにperoxidase共役treponemal抗原を利用するmicroplateベースの酵素の免疫学的検定(EIA)である(11)。 非レポネマル抗体測定は、迅速血漿レーギン（ＲＰＲ）試験（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，Ｆｒａｎｋｌｉｎ Ｌａｋｅｓ，ＮＪ）によって実施した。
研究標本は、定期的な梅毒検査のために私たちの研究室に送られたサンプルから選択され、臨床歴の知識なしに分析されました。 最初のBioplex SYPHGスクリーニングで反応性であった試料からのアリコートは、さらに、Trep-Sure EIAおよびRPRの両方によって試験された。 私たちの研究室では、過去のデータ（データは示されていない）に基づいて約3％の初期スクリーン陽性率で、低有病率の人口を提供しています。
最初のBioplexスクリーニングアッセイで反応性として同定された合計142サンプルは、上記のように反射試験を受けました。
最初のBioplexスクリーニングアッセイ トレポネマル抗体の存在は、試料の77％（110/142）におけるTrep-Sure EIAによって確認され、これは以前の多施設研究で報告された速度と同様の速度であった（3）。 しかし、確認の可能性は、患者のRPR状態およびBioplex screening assayで決定されたSYPHG値の両方に大きく依存していた（図10B）。 1). トレポネマル抗体の状態は、初期SYPHG値にかかわらず、すべてのRPR陽性サンプル（n=27）についてEIAによって確認された。 対照的に、不協和音の結果は、最初のスクリーニングで低SYPHG値を有するサンプルの増加頻度で、RPR陰性患者の28％（32/115）のために決定されました。 「真陽性」（ＥＩＡ確認）サンプルを同定するための高レベルの特異性を提供するカットオフ値を同定するために、受信機動作特性（ＲＯＣ）分析を実施した（図１ ０Ａ）。 2). 100％の特異性（信頼区間、89.3〜100.0％）を提供する6.0のカットオフAI値を選択した。 このレベル（78/78）を超えるスクリーニングSYPHG値を有するすべてのサンプルは、スクリーニングSYPHGレベルを有するサンプルのわずか50％（32/64）と比較してEIAによっ
トレポネマル抗体の結果の比較。 BioplexおよびTrep-Sure(EIA)アッセイの両方の使用により、ならびにRPR反応性について、トレポネマル抗体について合計142個のサンプルを試験した。 結果は、最初のBioplexスクリーニングアッセイで検出されたSYPHG値によって分類されます。真陽性（EIAで確認された）サンプルを予測するためのSYPHG値のROC分析。 感度は、確認EIAにおける反応性結果を有するサンプルの同定として定義された。 曲線下面積（AUC）の値は0.919（95％CI、0.87～0.96）であり、すべてのAI値≥5.8で100％の特異性が達成された。 カットオフとして6.0AIを使用して構築された2行2列の分割表も示されています。 二つのグループのためのEIA確認された結果の頻度は有意に異なっていた（P<0.0001）。
この格差がBioplexアッセイとTrep-Sureアッセイの間の分析感度の違いによるものではないことを確認するために、五つの強く陽性サンプル（>8.0AI）を正常血清で希釈し、Bioplexアッセイで1.0から2.0AIの値を達成した。 これらの希釈されたサンプルのすべての五つは、この確認試験は、これらの低濃度でトレポネマル抗体を検出することができることを実証し、Trep-Sureアッ これは、いくつかの弱い陽性の標本がそれにもかかわらず、EIAによって確認されたRPR陽性の試料で見られる結果と一致していた。
陰性のRPRを有する患者に対する陽性のトレポネマル抗体結果の関連性を決定することは、特に明確な臨床歴がない場合には困難であり得る。
このため、分析的な偽陽性の結果を特定し、最小限に抑えることが重要です。 このレポートでは、SYPHG値がこの決定を通知するのに役立ち、反射テストのための戦略を開発するときに使用できることを示しています。 本研究で使用されたスクリーニングアッセイは定量的アッセイとしてFDAによってクリアされていないが、これらのデータは、半定量的なAI結果がまだ確 このデータに基づいて、私たちは私たちの機関で梅毒スクリーニングのための以下のアルゴリズムを提供します。 最初のSYPHGスクリーニング試験で反応性であるすべてのサンプルは、さらにRPRによって試験されます。 RPR陽性のサンプルはSYPHGの試金の最初のAIにもかかわらずそれ以上のテストを、要求しません。 対照的に、最初の梅毒の結果が<6.0のRPR陰性試験は、自動的に確認的EIAを受けます。 このアルゴリズムは、反射EIA検査を梅毒検査のために送られたサンプルの約1％に制限しますが、不和な結果をもたらす可能性が最も高いサンプルに
一つの制限は、異なるメーカーからのtreponemalアッセイの標準化の欠如のために、この研究で同定された特定のSYPHG AI値は、最初のスクリーニングがBioplexアッセイを しかし、ここで実証された手法は、反射試験を誘発するための理想的なカットオフ値を決定するために、他のアッセイについて容易に評価するこ 重要な点は、確認検査を実施する際には、スクリーニングアッセイと同等またはそれ以上の低濃度のトレポネマル抗体を検出するための分析感度を 現在のtreponemal試金の相対的で分析的な感受性の組織的分析は実験室が適切なテストのアルゴリズムを確立するのを助ける貴重な用具である。
梅毒感染の患者を評価するためにtreponemal対nontreponemalアッセイを使用することの相対的なメリットを決定するには、さらなる研究が必要です。 しかし、方法にかかわらず、実験室は可能な限り分析的な偽陽性結果を識別するためのアプローチを開発すべきである。 Treponemal試金の分析的なパフォーマンス特性を理解することは、確認のテストを誘発するために試金特定のカットオフを確立することとともに、特に低有病率の人口を選別するときこの点で助けるのに使用することができるアプローチである。