efectul antifungic al uleiului esențial de lavandă (Lavandula angustifolia) și Clotrimazol asupra Candida albicans: un studiu in Vitro

rezumat

fundal. Tratamentul infecțiilor cu candidoză este o problemă importantă în sistemul de sănătate. Acest studiu a avut ca scop investigarea efectului in vitro al uleiului esențial de lavandă și clotrimazolului asupra C. albicans izolat din candidoza vaginală. Materiale și metode. În acest studiu clinic, s-a obținut C. albicans izolat din probele de secreție vaginală. Rezultate. Comparația perechilor a arătat că lavanda și clotrimazolul au avut o diferență semnificativă; această diferență în grupul de lavandă a fost mai mică decât clotrimazolul. Dar, după 48 de ore, nu s-a observat nicio diferență între grupuri. A existat o diferență semnificativă între grupurile de clotrimazol și DMSO. Comparând modificările între grupuri bazate pe aceeași diluție, la 24 h și 48 h în grupul clotrimazol, a arătat o diferență semnificativă de două ori în numărul de celule fungice că media sa în timpul 48 h a fost mai mică de 24 h. O diferență semnificativă a fost observată între cele două perioade în grupul de lavandă, numai la diluțiile de 1/20 și 1/80. Numărul mediu de celule fungice după 48 de ore a fost, de asemenea, mai mic în grupul de lavandă. Concluzii. Având în vedere că lavanda are activitate antifungică, aceasta poate fi utilizată ca agent antifungic. Cu toate acestea, sunt necesare mai multe studii clinice pentru a valida utilizarea sa în infecția cu candida.

1. Introducere

infecțiile ginecologice sunt cele mai frecvente motive pentru care femeile vizitează un medic și cer să fie tratate și, în ultimii ani, severitatea și incidența infecțiilor fungice au crescut surprinzător. Una dintre bolile cauzate de flora endogenă vaginală este candidoza. Se estimează că 75% dintre femei prezintă candidoză vulvar-vaginală cel puțin o dată în viață. Aproape 45% dintre femei suferă de această infecție de două ori pe an. Din fericire, doar un număr mic de femei suferă de infecții cronice recurente. C. albicans este germenul responsabil în 85-90% din infecțiile cu drojdie vaginală . Diagnosticul precoce și tratamentul adecvat al vaginitei sunt importante, deoarece eșecul de a trata în timp util și adecvat aceste infecții duce la complicații grave, cum ar fi boala inflamatorie pelvină, infertilitatea, durerea pelvină cronică, nașterea prematură și pericolele infecției cu HIV . Deoarece numărul pacienților cu SIDA și diabet și utilizarea antibioticelor cresc în fiecare zi și având în vedere că această boală fungică are o prevalență ridicată la această populație de pacienți, este important să se găsească un tratament sigur și, de asemenea, adecvat. Esența uleioasă a fost utilizată în mod tradițional în tratamentul și prevenirea diferitelor boli și infecții .

în epoca actuală, a avut loc o mare tendință în îngrijirea medicală în America, care este utilizarea medicinei complementare și alternative. Acesta include o serie de tratamente de la acupunctura și întâlniri de rugăciune și, mai important, utilizarea de medicamente pe bază de plante, care includ ierburi tradiționale și plante native din China, India, Africa, Europa și America. Deși nu s-au făcut cercetări științifice de bază asupra acestor plante, fundalul utilizării ierburilor în secolele trecute, precum și un produs natural, a dovedit că este o terapie relativ sigură. Deci, acest medicament alternativ a fost subliniat din cauza efectelor secundare limitate și a costului redus pentru aplicarea sa în terapia și prevenirea bolilor cronice .

lavanda (Lavandula angustifolia), ca un fel de plante medicinale, poate fi utilizată eficient în tratamentul descărcărilor vaginale. Uleiul esențial de lavandă este frecvent utilizat în medicina tradițională, iar impactul său asupra reducerii cantității de ciuperci Candida albicans a fost demonstrat în studii in vitro și clinice .pe de altă parte, unul dintre medicamentele chimice convenționale pentru tratarea candidozei vaginale este clotrimazolul. Deoarece acest medicament chimic are efecte secundare, cum ar fi creșterea enzimelor hepatice, urinarea dureroasă și depresia (datorită absorbției sistemice a medicamentului) și complicații precum iritarea și senzația de furnicături sau dermatită de contact și datorită rezistenței crescânde la medicamente antifungice, în acest studiu a fost evaluat efectul lavandei (Lavandula angustifolia) și clotrimazolului asupra creșterii candidozei vaginale , in vitro.

2. Metodologie

în acest studiu, eșantionarea a fost făcută vaginal în condiții sterile de la 45 de femei cu simptome clinice de infecție fungică vaginală care s-au referit la clinici afiliate Universității de științe Medicale Babol. După plasarea pacientului într-o poziție de litotomie și introducerea unui specul steril în vagin, a fost utilizat un tampon steril de bumbac pentru prelevarea de probe din fornixul posterior și din părțile laterale ale vaginului, iar proba a fost apoi plasată într-un tub steril. Probele au fost testate și livrate la laboratorul de Micologie al Universității de științe Medicale Babol. Doar 20 din cele 45 de probe au fost pozitive la testul in vitro. Metodele de referință utilizate au fost mediul de cultivare a Candida CHROMagar, tubul germinal format în serul uman și agar de făină de porumb pentru a face chlamydospore în acest mediu.

în laborator, s-a făcut frotiu umed pentru detectarea celulelor fungice de drojdie și a infecțiilor cu trichomonas; în plus, s-au efectuat culturi de laborator pe Sabouraud, mediu BHI pentru izolarea primară a ciupercilor și test de eprubetă de germeni prin ser de sânge uman cu CHROMagar pentru identificarea tipurilor de candida. Ciupercile au fost menținute și pasate în mediu Sabouraud pentru evaluarea in vitro a clotrimazolului 1%, iar esența uleioasă de lavandă pe C. albicans a fost examinată în peste 20 de probe izolate de la 45 de pacienți, utilizând metoda numărului de celule (macrodiluție). Picătura de clotrimazol este unul dintre principalele medicamente utilizate pentru tratarea infecțiilor fungice din Iran, iar compania Behvazan este una dintre mai multe companii farmaceutice din Iran care produce și distribuie acest medicament. Clotrimazol drop a fost achiziționat de la o farmacie din Babol, în timp ce uleiul esențial de lavandă a fost preparat și achiziționat de la compania Barij Essence. În această companie, părțile aeriene ale plantei de lavandă au fost folosite, iar uleiul esențial a fost luat de Clevenger. Compușii Lavandula angustifolia după GC (cromatografie gazoasă) au fost limonen, cineol, linalool și linalil acet. Nu este clar care dintre ele are efect antifungic. Se pare că compușii totali au efect antifungic.

în metoda macrodiluției, o cultură pură colonie loopful de C. albicans pe Agar de dextroză Sabouraud a furnizat o suspensie de 0,5 McF a concentrației candidale (103 și 106 celule fungice pe mL) în mediul de cultură al bulionului de agar BHI (infuzie de inimă cerebrală).

după prepararea suspensiei pe jumătate McFarland a C. albicans, s-a efectuat diluarea cu lavandă și clotrimazol. Astfel, lavanda cu solvent pur DMSO (dimetil sulfoxid) a fost diluată la 1/5 într-un tub steril și aceeași procedură a fost efectuată și pentru clotrimazol. Apoi, diluțiile de 1/10, 1/20, 1/40, 1/80 și 1/160 din fiecare medicament au fost preparate și turnate în 5 puțuri de microplacă. În cel de-al șaselea puț al unei microplăci, controlul DMSO a fost turnat și, în cele din urmă, 100 de microlitri de suspensie de ciuperci semi-McFarland au fost adăugați la toate puțurile unei microplăci. Această procedură a fost efectuată de trei ori pentru lavandă și de trei ori pentru Clotrimazol (în trei exemplare) și, în cele din urmă, microplăcile au fost plasate la bain marie la 37 C. După 24 și 48 de ore, celulele fungice au fost numărate folosind un microscop hemocitometru Neubauer (ca număr de globule roșii în hematologie). Picătura de clotrimazol (1%) a fost făcută în compania farmaceutică Behvazan, iar uleiul esențial de lavandă a fost preparat în compania Barij Essence. Datele obținute au fost analizate folosind statistici descriptive și au fost utilizate analiza neparametrică testul Kruskal-Wallis și testele Mann-Whitney și Wilcoxon.

3. Constatări

din cele 45 de probe suspectate de infecție vaginală cu candida, niciuna dintre probe nu a avut trichomoniasis într-un test direct, dar doar 25 de cazuri au fost pozitive pentru C. albicans. Din cauza eșecului celor 5 cazuri, 20 de cazuri de C. albicans obținute de la pacienți au fost testate in vitro. Analizând datele, s-a constatat prin testul de normalitate că distribuția datelor nu este normală. Astfel, s-au folosit testul nonparametric Kruskal-Wallis și testele Mann-Whitney și Wilcoxon. Comparația celor trei grupuri de controale de lavandă, clotrimazol și DMSO utilizând testul Kruskal-Wallis în primele 24 de ore de diluții 1/40 () și 1/160 () a indicat o diferență semnificativă între grupuri. În ceea ce privește celelalte diluții și după 48 de ore, numărul celulelor fungice nu a arătat diferențe semnificative între cele trei grupuri. Comparația dintre cele două grupuri de lavandă și clotrimazol folosind testul Mann-Whitney a arătat că numărul de celule fungice după 24 de ore, în diluții de 1/20 și 1/40 și 1/160, respectiv,,, și, a avut o diferență semnificativă între cele două grupuri. În aceste diluții, în primele 24 de ore, numărul de celule de ciuperci din grupul de lavandă a fost mai mic decât grupul clotrimazol (Figura 1) și, după 48 de ore, nu s-a constatat nicio diferență între grupuri (Figura 2). Dar o comparație a grupurilor de clotrimazol și DMSO a arătat că există o diferență semnificativă între cele două grupuri în diluții de 1/40 și 1/160 și nu există nicio diferență semnificativă între lavandă și DMSO. Deși, după cum se poate observa în Figura 1, numărul mediu de celule fungice la lavandă a fost mai mic decât celelalte două grupuri în majoritatea diluțiilor, testele nu au arătat diferențe semnificative statistic.

Figura 1
numărul de celule fungice din grupurile martor, clotrimazol și lavandă după 24 de ore.

Figura 2
numărul de celule fungice din grupurile martor, clotrimazol și lavandă după 48 de ore.

testul Wilcoxon a fost efectuat separat în grupuri de clotrimazol și lavandă pentru a compara modificările între grupuri pe baza acelorași diluții între 24h și 48h. Comparația grupului clotrimazol după 24h și 48h a arătat că a existat o diferență semnificativă între numărul de celule fungice pentru diluții de 1/10, 1/20, 1/40, 1/80 și, respectiv, 1/160, , , , , și , iar media sa în 48h a fost mai mică de 24h. în grupul de lavandă, s-a observat o diferență semnificativă între cele două perioade numai pentru diluții de 1/20 și 1/80 . De asemenea, în acest grup, numărul mediu de celule fungice a fost, de asemenea, mai mic după 48h. dar, pentru diluția 1/10, numărul mediu de celule fungice după 48h a fost mai mare decât cele mai multe diluții. Unele medicamente sunt mai eficiente la diluții mai mici.

4. Discuție

odată cu creșterea tratamentului fungic rezistent la medicamente în ultimii ani și efectele adverse ale agenților antifungici, nevoia de noi medicamente a devenit importantă. În studiul de față, s-a demonstrat că planta de lavandă are activitate antifungică. Studiile privind efectele antifungice ale lavandei au fost diferite. Lavanda a avut un efect inhibitor foarte slab al ciupercii în unele studii, dar, în majoritatea cazurilor, efectul său antifungic a fost semnificativ pozitiv . Devkatte și colab. într-un studiu privind uleiurile din plante ca potențiali inhibitori ai creșterii Candida albicans, s-a urmărit determinarea concentrației minime inhibitoare și a concentrației minime fungicide a 38 de esențe de ulei din plante. Ei au raportat că uleiul de scorțișoară a fost cel mai bun și a avut impactul concentrației de fungicid de 0,03% față de 4 tulpini de candida. Majoritatea uleiurilor au fost localizate în grupul moderat și 9 uleiuri au fost cele mai puțin eficiente în care lavanda a fost considerată în grupul cel mai puțin eficient . Mahboubi și colab. a raportat că lavanda are activitate antifungică moderată, în timp ce alte uleiuri esențiale, cum ar fi cimbru și geranium, au efecte antifungice puternice. Mahboubi a arătat că unele uleiuri esențiale au fost cele mai eficiente împotriva tulpinilor de candida . Practic, uleiul de lavandă are o istorie lungă de utilizare medicinală în medicina tradițională chineză (TCM) și are activitate antimicrobiană împotriva ciupercilor și bacteriilor . Mai multe combinații precum acetat de linalil, linalool, acid butiric și acid propionic sunt implicate în această activitate . Sa demonstrat într-un studiu similar că uleiul esențial de Lavandula angustifolia și componentele sale principale, linalool și acetat de linalil, pot ucide sau inhiba creșterea ciupercilor . Datele au arătat o diferență semnificativă între cele trei grupuri de lavandă, clotrimazol și control în diluții mai mari (1/40 și 1/160) pentru activitatea antifungică. Numărul de celule fungice din grupul de lavandă a fost mai mic decât celelalte grupuri. Behmanesh și colab. a raportat că numărul de celule fungice din tuburile care conțin infuzie de lavandă și esență de lavandă a fost mai mic decât tuburile de clotrimazol. De asemenea, cele mai eficiente efecte antifungice ale medicamentelor (număr mai mic de celule fungice) au fost observate la diluții mai mari . În studiul lor, D ‘ Auria și colab. s-a constatat că diluțiile mai mari de lavandă inhibă formarea ciupercii și alungirea fibrelor și reduc creșterea fungică și rata de difuzie a acesteia în țesut.

rezultatele comparației dintre cele două grupuri de lavandă și clotrimazol au arătat că numărul de celule fungice după 24 de ore, pentru diluții de 1/20 și 1/40 și 1/160, a avut diferențe semnificative. În aceste diluții, numărul de celule fungice din lavandă a fost mai mic decât clotrimazolul. Într-un studiu similar, s-a arătat că, în toate diluțiile diferite, clotrimazolul a avut cele mai mici efecte antifungice și cel mai mare număr de celule fungice. În acest studiu, am constatat că infuzia de plante de lavandă și esența ei în comparație cu clotrimazolul are o activitate antifungică mai mare împotriva C. albicans .

datele privind compararea clotrimazolului și a grupurilor de control au arătat diferențe semnificative în concentrațiile de 1/40 și 1/160 între cele două grupuri. Gharibi și colab. în studiul lor au comparat utilizarea concomitentă a fluconazolului și clotrimazolului cu doza frecventă în tratamentul candidozei recurente și au arătat că cele două metode de reducere a plângerilor și simptomelor de mâncărime, zgârieturi, edem, eritem și fisuri au fost foarte eficiente la două săptămâni după tratament () și simptomele candidozei vaginale, de asemenea, reduse în 6 săptămâni de tratament în grupul de intervenție și au avut o diferență semnificativă în grupul de control ().

rezultatele cercetărilor privind modificările dintre grupuri în funcție de aceeași diluție, dar după 24h și 48h în grupul clotrimazol au arătat că, pentru diluții de 1/10, 1/20, 1/40, 1/80 și 1/160, a existat o diferență semnificativă între cele două celule fungice în care media lor a fost mai mare în 24h decât 48h. de asemenea, în grupul de lavandă, la diluții de 1/20 și 1/80, s-a observat o diferență semnificativă de două ori, iar media numărul de celule fungice a fost mai mic după 48h. ghahramanlo și colab. a efectuat un studiu similar și a demonstrat creșterea efectelor antifungice în rășini acrilice cu creșterea concentrației nanoparticulelor și a timpului comparativ cu microorganismele de contact.

5. Concluzie

conform rezultatelor acestui studiu și a informațiilor înregistrate în cărțile vechi de plante medicinale din Iran, putem obține informații suplimentare cu cercetări suplimentare pentru a susține eficacitatea lavandei.

Conflict de interese

autorii nu au niciun conflict de interese.

recunoaștere

autorii mulțumesc adjunctului de cercetare și Tehnologie al Universității de științe Medicale Babol pentru sprijinul financiar.

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată. Câmpurile obligatorii sunt marcate cu *