Abstract
Sfondo. Il trattamento delle infezioni da candidosi è un problema importante nel sistema sanitario. Questo studio mirava a studiare l’effetto in vitro dell’olio essenziale di lavanda e del clotrimazolo su C. albicans isolato dalla candidosi vaginale. Materiali e metodi. In questo studio clinico è stato ottenuto C. albicans isolato dai campioni di perdite vaginali. Risultato. Il confronto a coppie ha mostrato che la lavanda e il clotrimazolo avevano una differenza significativa; questa differenza nel gruppo di lavanda era inferiore al clotrimazolo. Ma, dopo 48 ore, non c’era alcuna differenza tra i gruppi. C’era una differenza significativa tra i gruppi clotrimazolo e DMSO. Confrontando i cambiamenti tra gruppi basati sulla stessa diluizione, a 24 h e 48 h nel gruppo clotrimazolo, ha mostrato una differenza significativa due volte nel conteggio delle cellule fungine che la sua media durante 48 h era inferiore a 24 h. Una differenza significativa è stata osservata tra i due periodi nel gruppo lavanda, solo alle diluizioni di 1/20 e 1/80. Anche il numero medio di cellule fungine dopo 48 h era inferiore nel gruppo lavanda. Conclusione. Dato che la lavanda ha attività antifungina, questo può essere usato come agente antifungino. Tuttavia, sono necessari ulteriori studi clinici per convalidare il suo uso nell’infezione da candida.
1. Introduzione
Le infezioni ginecologiche sono i motivi più comuni per cui le donne visitano un medico e chiedono di essere trattate e, negli ultimi anni, la gravità e l’incidenza delle infezioni fungine sono aumentate sorprendentemente. Una delle malattie causate dalla flora endogena vaginale è la candidosi. Si stima che il 75% delle donne sperimenta la candidosi vulvare-vaginale almeno una volta nella vita. Quasi il 45% delle donne soffre di questa infezione due volte all’anno. Fortunatamente, solo un piccolo numero di donne soffre di infezioni ricorrenti croniche. C. albicans è il germe responsabile in 85-90% delle infezioni vaginali del lievito . La diagnosi precoce e il trattamento appropriato della vaginite sono importanti, perché il mancato trattamento tempestivo e appropriato di queste infezioni porta a gravi complicazioni come la malattia infiammatoria pelvica, l’infertilità, il dolore pelvico cronico, la nascita prematura e i pericoli dell’infezione da HIV . Poiché il numero di pazienti con AIDS e diabete e l’uso di antibiotici aumentano ogni giorno e dato che questa malattia fungina ha un’alta prevalenza in questa popolazione di pazienti, è importante trovare un trattamento sicuro e anche un trattamento adeguato. L’essenza oleosa è stata tradizionalmente utilizzata nel trattamento e nella prevenzione di varie malattie e infezioni .
Nell’era attuale, si è verificata una grande tendenza nell’assistenza medica in America che è l’uso della medicina complementare e alternativa. Esso comprende una gamma di trattamenti di agopuntura e incontri di preghiera e, ancora più importante, l’uso di erbe medicinali che includono le erbe tradizionali e piante autoctone provenienti da Cina, India, Africa, Europa e America. Sebbene la ricerca scientifica di base non sia stata fatta su queste piante, lo sfondo dell’uso delle erbe nei secoli passati, oltre ad essere un prodotto naturale, ha dimostrato che si tratta di una terapia relativamente sicura. Quindi, questa medicina alternativa è stata enfatizzata a causa degli effetti collaterali limitati e del basso costo per la sua applicazione nella terapia e nella prevenzione delle malattie croniche .
La lavanda (Lavandula angustifolia), come una sorta di erba medicinale, può essere efficacemente utilizzata nel trattamento delle scariche vaginali. L’olio essenziale di lavanda è spesso usato nella medicina tradizionale e il suo impatto sulla riduzione della quantità di fungo Candida albicans è stato dimostrato in studi in vitro e clinici .
D’altra parte, uno dei farmaci chimici convenzionali per trattare la candidosi vaginale è il clotrimazolo. Dal momento che questa sostanza chimica del farmaco ha effetti collaterali, come aumento degli enzimi epatici, minzione dolorosa, e la depressione (a causa dell’assorbimento sistemico del farmaco), e complicanze, quali irritazione e sensazione di formicolio o dermatite da contatto , e a causa della crescente resistenza ai farmaci antifungini , in questo studio, l’effetto di lavanda (Lavandula angustifolia) e clotrimazole sulla candidosi vaginale crescita, in vitro, è stato valutato.
2. Metodologia
In questo studio, il campionamento è stato effettuato per via vaginale in condizioni sterili da 45 donne con sintomi clinici di infezione fungina vaginale che hanno fatto riferimento a cliniche affiliate alla Babol University of Medical Sciences. Dopo aver posizionato il paziente in una posizione di litotomia e aver inserito uno speculum sterile nella vagina, è stato utilizzato un tampone di cotone sterile per il campionamento dal fornice posteriore e dai lati laterali della vagina, e il campione è stato quindi inserito in un tubo sterile. I campioni sono stati testati e consegnati al Laboratorio di micologia dell’Università di Scienze Mediche Babol. Solo 20 dei 45 campioni sono risultati positivi al test in vitro. I metodi di riferimento utilizzati erano l’ambiente di coltivazione di Candida CHROMagar, formata tubo germinale nel siero umano, e farina di mais agar per fare chlamydospore in questo ambiente.
In laboratorio, è stato fatto uno striscio umido per rilevare le cellule fungine del lievito e le infezioni da trichomonas; inoltre, sono state condotte colture di laboratorio su Sabouraud, BHI medium per l’isolamento primario di funghi e test del tubo germinale con siero di sangue umano con CHROMagar per identificare i tipi di candida. I funghi sono stati mantenuti e passati nel mezzo Sabouraud per la valutazione in vitro di clotrimazolo 1% e l’essenza oleosa di lavanda sul C. albicans è stata esaminata in oltre 20 campioni isolati da 45 pazienti, utilizzando il metodo della conta cellulare (macrodilution). Clotrimazole goccia è uno dei principali farmaci che viene usato per trattare le infezioni fungine in Iran e Behvazan Company è una delle diverse aziende farmaceutiche in Iran che produce e distribuisce questo farmaco. Clotrimazole goccia è stato acquistato da una farmacia a Babol, mentre l’olio essenziale di lavanda è stato preparato e acquistato da Barij Essence Company. In questa azienda sono state utilizzate le parti aeree della pianta di lavanda e il suo olio essenziale è stato preso da Clevenger. I composti di Lavandula angustifolia dopo GC (Gascromatografia) erano limonene, cineolo, linalolo e linalil acet. Non è chiaro quale di essi abbia un effetto antifungino. Sembra che i composti totali abbiano un effetto antifungino.
Nel metodo macrodilution, una colonia loopful coltura pura di C. albicans su Sabouraud destrosio agar ha fornito una sospensione di 0,5 McF di concentrazione candidale (103 e 106 cellule fungine per mL) nel terreno di coltura del brodo di agar BHI (Brain Heart Infusion).
Dopo aver preparato la sospensione half-McFarland della diluizione C. albicans, lavanda e clotrimazolo è stata eseguita. Pertanto, la lavanda con solvente puro DMSO (dimetilsolfossido) è stata diluita a 1/5 in un tubo sterile e la stessa procedura è stata eseguita anche per il clotrimazolo. Quindi, le diluizioni di 1/10, 1/20, 1/40, 1/80 e 1/160 di ciascun farmaco sono state preparate e versate in 5 pozzetti di una micropiastra. Nel sesto pozzetto di una micropiastra, è stato versato il controllo DMSO e, alla fine, sono stati aggiunti 100 microlitri di sospensione mezza McFarland di funghi a tutti i pozzetti di una micropiastra. Questa procedura è stata eseguita tre volte per la lavanda e tre volte per il clotrimazolo (in triplice copia) e, infine, le micropiastre sono state poste a bagnomaria a 37°C. Dopo 24 e 48 ore, le cellule fungine sono state contate utilizzando un microscopio Neubauer hemocytometer (come conta dei globuli rossi in ematologia). La goccia di clotrimazolo (1%) è stata fatta nella società farmaceutica Behvazan e l’olio essenziale di lavanda è stato preparato nella società Barij Essence. I dati ottenuti sono stati analizzati utilizzando statistiche descrittive e sono stati utilizzati i test di analisi non parametrica Kruskal-Wallis e Mann-Whitney e Wilcoxon.
3. Risultati
Dei 45 campioni sospettati di infezione vaginale da candida, nessuno dei campioni aveva tricomoniasi in un test diretto, ma solo 25 casi erano positivi per C. albicans. A causa del fallimento dei 5 casi, 20 casi di C. albicans ottenuti da pazienti sono stati testati in vitro. Analizzando i dati, è stato rilevato dal test di normalità che la distribuzione dei dati non è normale. Quindi, sono stati utilizzati i test non parametrici di Kruskal-Wallis e i test di Mann-Whitney e Wilcoxon. Il confronto dei tre gruppi di lavanda, clotrimazolo e controlli DMSO utilizzando il test Kruskal-Wallis nelle prime 24 ore di diluizioni 1/40 () e 1/160 () ha indicato una differenza significativa tra i gruppi. Per quanto riguarda le altre diluizioni e dopo 48h, il conteggio delle cellule fungine non ha mostrato differenze significative tra i tre gruppi. Il confronto tra i due gruppi di lavanda e clotrimazolo con test di Mann-Whitney ha mostrato che il conteggio delle cellule fungine dopo 24 ore, in diluizioni di 1/20 e 1/40 e 1/160, rispettivamente, , , e , aveva una differenza significativa tra i due gruppi. In queste diluizioni, durante le prime 24 ore, i conteggi cellulari dei funghi nel gruppo lavanda erano inferiori al gruppo clotrimazolo (Figura 1) e, dopo 48 ore, non è stata trovata alcuna differenza tra i gruppi (Figura 2). Ma un confronto tra i gruppi clotrimazolo e DMSO ha mostrato che esiste una differenza significativa tra i due gruppi nelle diluizioni di 1/40 e 1/160 e non vi è alcuna differenza significativa tra lavanda e DMSO. Sebbene, come si può vedere nella Figura 1, il numero medio di cellule fungine nella lavanda fosse inferiore rispetto agli altri due gruppi nella maggior parte delle diluizioni, i test non hanno mostrato differenze statisticamente significative.
Il test di Wilcoxon è stato eseguito separatamente nei gruppi di clotrimazolo e lavanda per confrontare le variazioni tra i gruppi in base alle stesse diluizioni tra 24h e 48h. Il confronto del gruppo clotrimazolo dopo 24h e 48h ha mostrato che c’era una differenza significativa tra il conteggio delle cellule fungine per diluizioni di 1/10, 1/20, 1/40, 1/80 e 1/160, rispettivamente,,,,, e , e la sua media in 48h era inferiore a 24h. Nel gruppo lavanda , è stata osservata una differenza significativa tra i due periodi solo per diluizioni di 1/20 e 1/80 . Inoltre, in questo gruppo, anche il numero medio di cellule fungine era inferiore dopo 48h. Ma, per la diluizione 1/10, il numero medio di cellule fungine dopo 48h era superiore alle più diluizioni. Alcuni farmaci sono più efficaci a diluizioni inferiori.
4. Discussione
Con l’aumento del trattamento fungino resistente ai farmaci negli ultimi anni e gli effetti avversi degli agenti antifungini, la necessità di nuovi farmaci è diventata importante. Nel presente studio, è stato dimostrato che l’erba di lavanda ha attività antifungina. Gli studi sugli effetti antifungini della lavanda erano diversi. La lavanda ha avuto un effetto inibitorio molto debole del fungo in alcuni studi, ma, nella maggior parte dei casi, il suo effetto antifungino è stato significativamente positivo . Devkatte et al. in uno studio sugli oli vegetali come potenziali inibitori della crescita di Candida albicans mirava a determinare la concentrazione inibitoria minima e la concentrazione fungicida minima di 38 essenze di olio vegetale. Hanno riferito che l’olio di cannella era il migliore e aveva l’impatto della concentrazione di fungicida dello 0,03% contro i ceppi di candida 4. La maggior parte degli oli si trovavano nel gruppo moderato e gli oli 9 erano i meno efficaci in cui la lavanda era considerata nel gruppo meno efficace . Mahboubi et al. ha riferito che la lavanda ha moderata attività antifungina mentre altri oli essenziali, come timo e geranio, hanno forti effetti antifungini. Mahboubi ha dimostrato che alcuni oli essenziali erano più efficaci contro i ceppi di candida . Fondamentalmente, l’olio di lavanda ha una lunga storia di uso medicinale nella medicina tradizionale cinese (TCM) e ha attività antimicrobica contro funghi e batteri . Diverse combinazioni come l’acetato di linalile, il linalolo, l’acido butirrico e l’acido propionico sono coinvolti in questa attività . In uno studio simile è stato dimostrato che l’olio essenziale di Lavandula angustifolia e i suoi componenti principali, linalolo e acetato di linalile, possono uccidere o inibire la crescita dei funghi . I dati hanno mostrato una differenza significativa tra i tre gruppi di lavanda, clotrimazolo e controllo in diluizioni più elevate (1/40 e 1/160) per l’attività antifungina. Il numero di cellule fungine nel gruppo lavanda era inferiore rispetto agli altri gruppi. Behmanesh et al. ha riferito che il conteggio delle cellule fungine in provette contenenti infusione di lavanda e essenza di lavanda era inferiore ai tubi di clotrimazolo. Inoltre, gli effetti antifungini più efficaci dei farmaci (minor numero di cellule fungine) sono stati osservati a diluizioni più elevate . Nel loro studio, D’Auria et al. ha scoperto che diluizioni più elevate di lavanda inibiscono la formazione di funghi e l’allungamento delle fibre e riducono la crescita fungina e la sua velocità di diffusione nel tessuto.
I risultati del confronto tra i due gruppi di lavanda e clotrimazolo hanno mostrato che il numero di cellule fungine dopo 24h, per diluizioni di 1/20 e 1/40 e 1/160, presentava differenze significative. In queste diluizioni, il numero di cellule fungine nella lavanda era inferiore al clotrimazolo. In uno studio simile, è stato dimostrato che, in tutte le diverse diluizioni, il clotrimazolo ha avuto i più bassi effetti antifungini e il più alto numero di cellule fungine. In questo studio, abbiamo scoperto che l’infusione di erbe di lavanda e la sua essenza rispetto al clotrimazolo ha una maggiore attività antifungina contro C. albicans .
I dati sul confronto tra clotrimazolo e gruppi di controllo hanno mostrato differenze significative nelle concentrazioni di 1/40 e 1/160 tra i due gruppi. Gharibi et al. nel loro studio ha confrontato l’uso concomitante di fluconazolo e clotrimazole con frequenti dose nel trattamento di candidosi ricorrenti e ha mostrato che i due metodi per ridurre disturbi e sintomi di prurito, graffi, edema, eritema, e le fessure erano molto efficaci due settimane dopo il trattamento (e i sintomi della candidosi vaginale ridotta anche in 6 settimane di trattamento nel gruppo di intervento e aveva una differenza significativa nel gruppo di controllo ().
risultati della Ricerca sui cambiamenti tra i gruppi secondo la stessa diluizione, ma dopo 24h e 48h nelle clotrimazole gruppo ha dimostrato che, per le diluizioni di 1/10, 1/20, 1/40, 1/80, e 1/160, c’era una differenza significativa tra i due fungine conta delle cellule in cui la media era più alta in 24 h 48 h. Inoltre, la lavanda gruppo, a 1/20 e 1/80 diluizioni una differenza significativa è stata osservata per due volte e la media delle cellule fungine conte era inferiore dopo 48h. Ghahramanlo et al. condotto un sondaggio simile e ha dimostrato l’aumento degli effetti antifungini delle resine acriliche con l’aumento della concentrazione e del tempo delle nanoparticelle rispetto ai microrganismi di contatto.
5. Conclusione
Secondo i risultati di questo studio e le informazioni registrate nei vecchi libri di erbe medicinali dell’Iran, possiamo ottenere ulteriori informazioni con ulteriori ricerche per supportare l’efficacia della lavanda.
Conflitto di interessi
Gli autori non hanno alcun conflitto di interessi.
Riconoscimento
Gli autori ringraziano il Deputato di Ricerca e Tecnologia dell’Università di Scienze Mediche Babol per il sostegno finanziario.