Résumé
Contexte. Le traitement des infections à candidose est un problème important dans le système de santé. Cette étude visait à étudier l’effet in vitro de l’huile essentielle de lavande et du clotrimazole sur C. albicans isolé de la candidose vaginale. Matériaux et méthodes. Dans cet essai clinique, C. albicans isolé des échantillons de pertes vaginales a été obtenu. Résultat. La comparaison par paires a montré que la lavande et le clotrimazole présentaient une différence significative; cette différence dans le groupe lavande était inférieure à celle du clotrimazole. Mais, après 48 heures, aucune différence n’a été observée entre les groupes. Il y avait une différence significative entre les groupes clotrimazole et DMSO. La comparaison des changements entre groupes basés sur la même dilution, à 24 h et 48 h dans le groupe clotrimazole, a montré une différence significative deux fois dans le nombre de cellules fongiques que sa moyenne pendant 48 h était inférieure à 24 h. Une différence significative a été observée entre les deux périodes dans le groupe lavande, uniquement aux dilutions de 1/20 et 1/80. Le nombre moyen de cellules fongiques après 48 h était également plus faible dans le groupe lavande. Conclusion. Étant donné que la lavande a une activité antifongique, cela peut être utilisé comme agent antifongique. Cependant, d’autres études cliniques sont nécessaires pour valider son utilisation dans l’infection à candida.
1. Introduction
Les infections gynécologiques sont les raisons les plus courantes pour lesquelles les femmes consultent un médecin et demandent à être traitées et, ces dernières années, la gravité et l’incidence des infections fongiques ont augmenté de manière surprenante. L’une des maladies causées par la flore endogène vaginale est la candidose. On estime que 75% des femmes présentent une candidose vulvo-vaginale au moins une fois dans leur vie. Près de 45% des femmes souffrent de cette infection deux fois par an. Heureusement, seul un petit nombre de femmes souffrent d’infections chroniques récurrentes. C. albicans est le germe responsable de 85 à 90% des infections vaginales à levures. Un diagnostic précoce et un traitement approprié de la vaginite sont importants, car le fait de ne pas traiter ces infections en temps opportun et de manière appropriée entraîne de graves complications telles qu’une maladie inflammatoire pelvienne, l’infertilité, des douleurs pelviennes chroniques, une naissance prématurée et les dangers de l’infection par le VIH. Étant donné que le nombre de patients atteints du sida et du diabète et l’utilisation d’antibiotiques augmentent chaque jour et étant donné que cette maladie fongique a une prévalence élevée dans cette population de patients, il est important de trouver un traitement sûr et également approprié. L’essence huileuse a traditionnellement été utilisée dans le traitement et la prévention de diverses maladies et infections.
À l’époque actuelle, une grande tendance dans les soins médicaux en Amérique s’est produite, à savoir l’utilisation de la médecine complémentaire et alternative. Il comprend une gamme de traitements allant de l’acupuncture et des réunions de prière et, plus important encore, l’utilisation de médicaments à base de plantes qui incluent les herbes traditionnelles et les plantes indigènes de Chine, d’Inde, d’Afrique, d’Europe et d’Amérique. Bien que la recherche scientifique de base n’ait pas été effectuée sur ces plantes, le contexte de l’utilisation d’herbes au cours des siècles passés, en plus d’être un produit naturel, a prouvé qu’il s’agissait d’une thérapie relativement sûre. Ainsi, cette médecine alternative a été soulignée en raison des effets secondaires limités et du faible coût de son application dans la thérapie et la prévention des maladies chroniques.
La lavande (Lavandula angustifolia), comme une sorte d’herbe médicinale, peut être utilisée efficacement dans le traitement des écoulements vaginaux. L’huile essentielle de lavande est fréquemment utilisée en médecine traditionnelle et son impact sur la réduction de la quantité de champignon Candida albicans a été démontré dans des études in vitro et cliniques.
D’autre part, l’un des médicaments chimiques conventionnels pour traiter la candidose vaginale est le clotrimazole. Étant donné que ce médicament chimique a des effets secondaires, tels qu’une augmentation des enzymes hépatiques, une miction douloureuse et une dépression (due à l’absorption systémique du médicament), et des complications telles qu’une irritation et une sensation de picotement ou de dermatite de contact, et en raison de la résistance croissante aux médicaments antifongiques, dans cette étude, l’effet de la lavande (Lavandula angustifolia) et du clotrimazole sur la croissance de la candidose vaginale, in vitro, a été évalué.
2. Méthodologie
Dans cette étude, l’échantillonnage a été effectué par voie vaginale dans des conditions stériles auprès de 45 femmes présentant des symptômes cliniques d’infection fongique vaginale qui se sont référées à des cliniques affiliées à l’Université des sciences médicales de Babol. Après avoir placé la patiente en position de lithotomie et placé un spéculum stérile dans le vagin, un coton-tige stérile a été utilisé pour prélever le fornix postérieur et les côtés latéraux du vagin, puis l’échantillon a été placé dans un tube stérile. Les échantillons ont été testés et livrés au Laboratoire de mycologie de l’Université des Sciences médicales de Babol. Seulement 20 des 45 échantillons étaient positifs lors d’un test in vitro. Les méthodes référencées utilisées étaient l’environnement de culture de Candida CHROMagar, tube germinal formé dans le sérum humain, et la gélose de farine de maïs pour faire de la chlamydospore dans cet environnement.
En laboratoire, un frottis humide a été effectué pour détecter les cellules fongiques de levure et les infections à trichomonas; en outre, une culture en laboratoire sur Sabouraud, milieu BHI pour l’isolement primaire des champignons et un test de tube germinal par sérum sanguin humain avec CHROMagar pour identifier les types de candida ont été effectués. Les champignons ont été maintenus et passés en milieu Sabouraud pour l’évaluation in vitro du clotrimazole à 1% et l’essence huileuse de lavande sur le C. albicans a été examinée dans plus de 20 échantillons isolés de 45 patients, en utilisant la méthode de comptage cellulaire (macrodilution). La goutte de clotrimazole est l’un des principaux médicaments utilisés pour traiter les infections fongiques en Iran et la société Behvazan est l’une des nombreuses sociétés pharmaceutiques iraniennes qui produit et distribue ce médicament. La goutte de clotrimazole a été achetée dans une pharmacie de Babol, tandis que l’huile essentielle de lavande a été préparée et achetée auprès de la société Barij Essence. Dans cette entreprise, les parties aériennes de la plante de lavande ont été utilisées et son huile essentielle a été prélevée par Clevenger. Les composés de Lavandula angustifolia après GC (chromatographie en phase gazeuse) étaient le limonène, le cinéole, le linalol et le linalyl acet. On ne sait pas lequel d’entre eux a un effet antifongique. Il semble que les composés totaux aient un effet antifongique.
Dans la méthode de macrodilution, une culture pure de colonie bouclée de C. albicans sur gélose Sabouraud dextrose a fourni une suspension de 0,5 McF de concentration candidale (103 et 106 cellules fongiques par mL) dans un milieu de culture en bouillon de gélose BHI (Brain Heart Infusion).
Après préparation de la suspension demi-McFarland du C. albicans, on a procédé à une dilution de lavande et de clotrimazole. Ainsi, la lavande avec le solvant pur DMSO (Diméthylsulfoxyde) a été diluée à 1/5 dans un tube stérile, et la même procédure a également été effectuée pour le clotrimazole. Ensuite, les dilutions de 1/10, 1/20, 1/40, 1/80 et 1/160 de chaque médicament ont été préparées et versées dans 5 puits d’une microplaque. Dans le sixième puits d’une microplaque, le contrôle DMSO a été versé et, finalement, 100 microlitres de suspension de champignons demi-McFarland ont été ajoutés à tous les puits d’une microplaque. Cette procédure a été réalisée trois fois pour la lavande et trois fois pour le clotrimazole (en triple exemplaire) et, enfin, les microplaques ont été placées dans un bain marie à 37° C. Après 24 et 48 heures, les cellules fongiques ont été comptées à l’aide d’un hémocytomètre Neubauer au microscope (comme numération des globules rouges en hématologie). La goutte de clotrimazole (1%) a été fabriquée dans la société pharmaceutique Behvazan et l’huile essentielle de lavande a été préparée dans la société Barij Essence. Les données obtenues ont été analysées à l’aide de statistiques descriptives et l’analyse non paramétrique du test de Kruskal-Wallis et des tests de Mann-Whitney et de Wilcoxon a été utilisée.
3. Résultats
Sur les 45 échantillons suspectés d’infection vaginale à candida, aucun des échantillons ne présentait de trichomonase lors d’un test direct, mais seuls 25 cas étaient positifs pour C. albicans. En raison de l’échec des 5 cas, 20 cas de C. albicans obtenus auprès de patients ont été testés in vitro. En analysant les données, il a été constaté par test de normalité que la distribution des données n’est pas normale. Ainsi, le test non paramétrique de Kruskal-Wallis et les tests de Mann-Whitney et Wilcoxon ont été utilisés. La comparaison des trois groupes témoins de lavande, de clotrimazole et de DMSO à l’aide du test de Kruskal-Wallis dans les premières 24 heures de dilutions 1/40 () et 1/160 () a indiqué une différence significative entre les groupes. En ce qui concerne les autres dilutions et après 48h, le nombre de cellules fongiques n’a montré aucune différence significative entre les trois groupes. La comparaison entre les deux groupes de lavande et de clotrimazole à l’aide du test de Mann-Whitney a montré que le nombre de cellules fongiques après 24 heures, dans des dilutions de 1/20 et 1/40 et 1/160, respectivement, ,, et, avait une différence significative entre les deux groupes. Dans ces dilutions, au cours des premières 24 heures, le nombre de cellules de champignons dans le groupe lavande était inférieur à celui du groupe clotrimazole (Figure 1) et, après 48h, aucune différence n’a été trouvée entre les groupes (figure 2). Mais une comparaison des groupes clotrimazole et DMSO a montré qu’il existe une différence significative entre les deux groupes dans les dilutions de 1/40 et 1/160 et qu’il n’y a pas de différence significative entre la lavande et le DMSO. Bien que, comme on peut le voir sur la figure 1, le nombre moyen de cellules fongiques dans la lavande était inférieur à celui des deux autres groupes dans la plupart des dilutions, les tests n’ont montré aucune différence statistiquement significative.
Le test de Wilcoxon a été effectué séparément dans les groupes clotrimazole et lavande pour comparer les changements entre les groupes sur la base des mêmes dilutions entre 24h et 48h. La comparaison du groupe clotrimazole après 24h et 48h a montré qu’il y avait une différence significative entre le nombre de cellules fongiques pour les dilutions de 1/10, 1/20, 1/40, 1/80 et 1/160, respectivement, ,,, et, et sa moyenne en 48h était inférieure à 24h. Dans le groupe lavande, une différence significative a été observée entre les deux périodes uniquement pour les dilutions de 1/20 et 1/80. De plus, dans ce groupe, le nombre moyen de cellules fongiques était également inférieur après 48h. Mais, pour la dilution 1/10, le nombre moyen de cellules fongiques après 48h était plus élevé que le nombre de dilutions. Certains médicaments sont plus efficaces à des dilutions inférieures.
4. Discussion
Avec l’augmentation du traitement fongique résistant aux médicaments ces dernières années et les effets indésirables des agents antifongiques, le besoin de nouveaux médicaments est devenu important. Dans la présente étude, il a été montré que l’herbe de lavande a une activité antifongique. Les études sur les effets antifongiques de la lavande étaient différentes. La lavande avait un effet inhibiteur très faible du champignon dans certaines études, mais, dans la plupart des cas, son effet antifongique était significativement positif. Devkatte et coll. dans une étude sur les huiles à base de plantes en tant qu’inhibiteurs potentiels de la croissance de Candida albicans, l’objectif était de déterminer la concentration inhibitrice minimale et la concentration fongicide minimale de 38 essences d’huiles à base de plantes. Ils ont rapporté que l’huile de cannelle était la meilleure et avait l’impact de la concentration de fongicide de 0,03% contre 4 souches de candida. La plupart des huiles étaient situées dans le groupe modéré et 9 huiles étaient les moins efficaces dans lesquelles la lavande était considérée dans le groupe le moins efficace. Mahboubi et coll. rapporté que la lavande a une activité antifongique modérée tandis que d’autres huiles essentielles, telles que le thym et le géranium, ont de forts effets antifongiques. Mahboubi a montré que certaines huiles essentielles étaient les plus efficaces contre les souches de candida. Fondamentalement, l’huile de lavande a une longue histoire d’utilisation médicinale en médecine traditionnelle chinoise (MTC) et a une activité antimicrobienne contre les champignons et les bactéries. Plusieurs combinaisons telles que l’acétate de linalyle, le linalol, l’acide butyrique et l’acide propionique sont impliquées dans cette activité. Il a été démontré dans une étude similaire que l’huile essentielle de Lavandula angustifolia et ses principaux composants, le linalol et l’acétate de linalyle, peuvent tuer ou inhiber la croissance des champignons. Les données ont montré une différence significative entre les trois groupes de lavande, de clotrimazole et de contrôle dans des dilutions plus élevées (1/40 et 1/160) pour l’activité antifongique. Le nombre de cellules fongiques dans le groupe lavande était inférieur à celui des autres groupes. Behmanesh et coll. a rapporté que le nombre de cellules fongiques dans les tubes contenant de l’infusion de lavande et de l’essence de lavande était inférieur à celui des tubes de clotrimazole. En outre, les effets antifongiques les plus efficaces des médicaments (nombre de cellules fongiques inférieur) ont été observés à des dilutions plus élevées. Dans leur étude, D’Auria et al. a constaté que des dilutions plus élevées de lavande inhibent la formation de champignons et l’allongement des fibres et réduisent la croissance fongique et son taux de diffusion dans les tissus.
Les résultats de la comparaison entre les deux groupes de lavande et de clotrimazole ont montré que le nombre de cellules fongiques après 24h, pour des dilutions de 1/20 et 1/40 et 1/160, présentait des différences significatives. Dans ces dilutions, le nombre de cellules fongiques dans la lavande était inférieur à celui du clotrimazole. Dans une étude similaire, il a été montré que, dans toutes les différentes dilutions, le clotrimazole avait les effets antifongiques les plus faibles et le nombre de cellules fongiques le plus élevé. Dans cette étude, nous avons constaté que l’infusion d’herbe de lavande et de son essence par rapport au clotrimazole a une activité antifongique plus élevée contre C. albicans.
Les données sur la comparaison du clotrimazole et des groupes témoins ont montré des différences significatives de concentrations de 1/40 et 1/160 entre les deux groupes. Gharibi et coll. dans leur étude, ils ont comparé l’utilisation simultanée de fluconazole et de clotrimazole à des doses fréquentes dans le traitement de la candidose récurrente et ont montré que les deux méthodes de réduction des plaintes et des symptômes de démangeaisons, de grattage, d’œdème, d’érythème et de fissures étaient très efficaces deux semaines après le traitement () et que les symptômes de candidose vaginale étaient également réduits en 6 semaines de traitement dans le groupe d’intervention et présentaient une différence significative dans le groupe témoin ().
Les résultats de la recherche sur les changements entre les groupes selon la même dilution mais après 24h et 48h dans le groupe clotrimazole ont montré que, pour des dilutions de 1/10, 1/20, 1/40, 1/80 et 1/160, il y avait une différence significative entre les deux comptages de cellules fongiques dans lesquels leur moyenne était plus élevée en 24h que 48h. De plus, dans le groupe lavande, aux dilutions de 1/20 et 1/80, une différence significative a été observée deux fois et la moyenne a été le nombre de cellules fongiques était plus faible après 48h. Ghahramanlo et al. a mené une enquête similaire et a démontré l’augmentation des effets antifongiques des résines acryliques avec une concentration et un temps de nanoparticules croissants par rapport aux microorganismes de contact.
5. Conclusion
Selon les résultats de cette étude et les informations enregistrées dans les anciens livres d’herbes médicinales d’Iran, nous pouvons obtenir des informations supplémentaires avec d’autres recherches pour soutenir l’efficacité de la lavande.
Conflit d’intérêts
Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts.
Remerciements
Les auteurs remercient l’Adjoint à la Recherche et à la Technologie de l’Université des Sciences Médicales de Babol pour son soutien financier.