Resumen
Fondo. El tratamiento de las infecciones por candidiasis es un problema importante en el sistema de atención de la salud. Este estudio tuvo como objetivo investigar el efecto in vitro del aceite esencial de lavanda y el clotrimazol en C. albicans aislada de candidiasis vaginal. Materiales y Métodos. En este ensayo clínico, se obtuvo C. albicans aislado de las muestras de flujo vaginal. Resultado. La comparación de pares mostró que la lavanda y el clotrimazol tuvieron una diferencia significativa; esta diferencia en el grupo de lavanda fue menor que el clotrimazol. Pero, después de 48 horas, no se observaron diferencias entre los grupos. Hubo una diferencia significativa entre los grupos de clotrimazol y DMSO. La comparación de los cambios entre grupos basados en la misma dilución, a las 24 h y 48 h en el grupo de clotrimazol, mostró una diferencia significativa dos veces en el recuento de células fúngicas que su promedio durante 48 h fue inferior a 24 h. Se observó una diferencia significativa entre los dos períodos en el grupo lavanda, solo en las diluciones de 1/20 y 1/80. El recuento promedio de células fúngicas después de 48 h también fue menor en el grupo de lavanda. Conclusion. Dado que la lavanda tiene actividad antimicótica, se puede usar como agente antimicótico. Sin embargo, son necesarios más estudios clínicos para validar su uso en la infección por candida.
1. Introducción
Las infecciones ginecológicas son las razones más comunes por las que las mujeres visitan a un médico y piden ser tratadas y, en los últimos años, la gravedad y la incidencia de las infecciones por hongos han aumentado sorprendentemente. Una de las enfermedades causadas por la flora endógena vaginal es la candidiasis. Se estima que el 75% de las mujeres experimentan candidiasis vulvar-vaginal al menos una vez en su vida. Casi el 45% de las mujeres sufren esta infección dos veces al año. Afortunadamente, solo un pequeño número de mujeres sufren infecciones crónicas recurrentes. C. albicans es el germen responsable en el 85-90% de las infecciones vaginales por hongos. El diagnóstico temprano y el tratamiento adecuado de la vaginitis son importantes, porque no tratar de manera oportuna y adecuada estas infecciones conduce a complicaciones graves, como enfermedad inflamatoria pélvica, infertilidad, dolor pélvico crónico, parto prematuro y los peligros de la infección por el VIH . Dado que el número de pacientes con SIDA y diabetes y el uso de antibióticos aumentan cada día y dado que esta enfermedad fúngica tiene una alta prevalencia en esta población de pacientes, es importante encontrar un tratamiento seguro y también adecuado. La esencia aceitosa se ha utilizado tradicionalmente en el tratamiento y la prevención de diversas enfermedades e infecciones .
En la era actual, se ha producido una gran tendencia en la atención médica en Estados Unidos, que es el uso de la medicina complementaria y alternativa. Incluye una gama de tratamientos de acupuntura y reuniones de oración y, lo que es más importante, el uso de hierbas medicinales que incluyen hierbas tradicionales y plantas nativas de China, India, África, Europa y América. Aunque no se han realizado investigaciones científicas básicas sobre estas plantas, el trasfondo del uso de hierbas durante los últimos siglos, además de ser un producto natural, ha demostrado que es una terapia relativamente segura. Por lo tanto, esta medicina alternativa se ha enfatizado debido a los efectos secundarios limitados y el bajo costo de su aplicación en la terapia y prevención de enfermedades crónicas .
La lavanda (Lavandula angustifolia), como un tipo de hierba medicinal, se puede usar de manera efectiva en el tratamiento de las descargas vaginales. El aceite esencial de lavanda se usa con frecuencia en la medicina tradicional y su impacto en la reducción de la cantidad de hongo Candida albicans se ha demostrado en estudios clínicos e in vitro .
Por otro lado, uno de los fármacos químicos convencionales para tratar la candidiasis vaginal es el clotrimazol. Dado que este medicamento químico tiene efectos secundarios, como aumento de las enzimas hepáticas, dolor al orinar y depresión (debido a la absorción sistémica del medicamento), y complicaciones como irritación y sensación de hormigueo o dermatitis de contacto, y debido a la creciente resistencia a los medicamentos antimicóticos , en este estudio se evaluó el efecto de la lavanda (Lavandula angustifolia) y el clotrimazol en el crecimiento de la candidiasis vaginal , in vitro.
2. Metodología
En este estudio, el muestreo se realizó por vía vaginal en condiciones estériles de 45 mujeres con síntomas clínicos de infección fúngica vaginal que derivaron a clínicas afiliadas a la Universidad de Ciencias Médicas de Babol. Después de colocar a la paciente en una posición de litotomía y colocar un espéculo estéril en la vagina, se utilizó un hisopo de algodón estéril para tomar muestras del fórnix posterior y los lados laterales de la vagina, y luego se colocó la muestra en un tubo estéril. Las muestras fueron analizadas y entregadas al Laboratorio de Micología de la Universidad de Ciencias Médicas de Babol. Solo 20 de las 45 muestras dieron positivo en la prueba in vitro. Los métodos referenciados utilizados fueron el ambiente de cultivo de Candida CHROMagar, tubo germinativo formado en suero humano y agar de harina de maíz para hacer clamidospora en este ambiente.
En el laboratorio, se realizó frotis húmedo para detectar las células fúngicas de levadura e infecciones por tricomonas; además, se realizó cultivo de laboratorio en Sabouraud, medio BHI para aislamiento primario de hongos y prueba de tubo germinal por suero sanguíneo humano con CHROMagar para identificar los tipos de candida. Los hongos se mantuvieron y pasaron en medio Sabouraud para la evaluación in vitro de clotrimazol al 1% y se examinó la esencia aceitosa de lavanda en C. albicans en más de 20 muestras aisladas de 45 pacientes, utilizando el método de conteo celular (macrodilución). La gota de clotrimazol es uno de los principales medicamentos que se usa para tratar infecciones por hongos en Irán y Behvazan Company es una de las varias compañías farmacéuticas en Irán que produce y distribuye este medicamento. La gota de clotrimazol se compró en una farmacia en Babol, mientras que el aceite esencial de lavanda se preparó y compró en Barij Essence Company. En esta empresa, se utilizaron las partes aéreas de la planta de lavanda y su aceite esencial fue tomado por Clevenger. Los compuestos de Lavandula angustifolia después de GC (Cromatografía de gases) fueron limoneno, cineol, linalol y linalil acet. No está claro cuál de ellos tiene efecto antimicótico. Parece que los compuestos totales tienen efecto antimicótico.
En el método de macrodilución, una colonia en bucle cultivo puro de C. albicans en agar de dextrosa Sabouraud proporcionó una suspensión de 0,5 McF de concentración de cándida (103 y 106 células fúngicas por ml) en un medio de cultivo de caldo de agar BHI (Infusión de corazón Cerebral).
Después de preparar la suspensión media McFarland de la dilución de C. albicans, lavanda y clotrimazol se realizó. Por lo tanto, la lavanda con disolvente puro DMSO (dimetilsulfóxido) se diluyó a 1/5 en un tubo estéril, y el mismo procedimiento también se realizó para el clotrimazol. Luego, se prepararon las diluciones de 1/10, 1/20, 1/40, 1/80 y 1/160 de cada fármaco y se vertieron en 5 pocillos de una microplaca. En el sexto pozo de una microplaca, se vertió el control DMSO y, en última instancia, se agregaron 100 microlitros de suspensión de hongos de media McFarland a todos los pozos de una microplaca. Este procedimiento se realizó tres veces para lavanda y tres veces para clotrimazol (en triplicado) y, finalmente, las microplacas se colocaron al baño maría a 37°C. Después de 24 y 48 horas, las células fúngicas se contaron con un hemocitómetro Neubauer al microscopio (como recuento de glóbulos rojos en hematología). La gota de clotrimazol (1%) se hizo en Behvazan Pharmaceutical Company y el aceite esencial de lavanda se preparó en Barij Essence Company. Los datos obtenidos se analizaron mediante estadística descriptiva y se utilizó el análisis no paramétrico test de Kruskal-Wallis y test de Mann-Whitney y Wilcoxon.
3. Hallazgos
De las 45 muestras sospechosas de infección vaginal por candida, ninguna de las muestras presentó tricomoniasis en una prueba directa, pero solo 25 casos dieron positivo para C. albicans. Debido al fracaso de los 5 casos, se probaron in vitro 20 casos de C. albicans obtenidos de pacientes. Al analizar los datos, se encontró mediante la prueba de normalidad que la distribución de los datos no es normal. Así, se utilizaron las pruebas no paramétricas de Kruskal-Wallis y de Mann-Whitney y Wilcoxon. La comparación de los tres grupos de control de lavanda, clotrimazol y DMSO utilizando la prueba de Kruskal-Wallis en las primeras 24 horas de diluciones 1/40 () y 1/160 () indicó una diferencia significativa entre los grupos. Con respecto a las otras diluciones y después de 48h, el recuento de células fúngicas no mostró diferencias significativas entre los tres grupos. La comparación entre los dos grupos de lavanda y clotrimazol mediante la prueba de Mann-Whitney mostró que el recuento de células fúngicas después de 24 horas, en diluciones de 1/20 y 1/40 y 1/160, respectivamente,, y , tuvo diferencia significativa entre los dos grupos. En estas diluciones, durante las primeras 24 horas, los recuentos celulares de hongos en el grupo lavanda fueron inferiores a los del grupo clotrimazol (Figura 1) y, a las 48h, no se encontró diferencia entre los grupos (Figura 2). Sin embargo, una comparación de los grupos de clotrimazol y DMSO mostró que hay una diferencia significativa entre los dos grupos en diluciones de 1/40 y 1/160 y no hay diferencia significativa entre lavanda y DMSO. Aunque, como se puede ver en la Figura 1, el recuento promedio de células fúngicas en lavanda fue inferior al de los otros dos grupos en la mayoría de las diluciones, las pruebas no mostraron diferencias estadísticamente significativas.
La prueba de Wilcoxon se realizó por separado en los grupos de clotrimazol y lavanda para comparar los cambios entre los grupos con base en las mismas diluciones entre 24 y 48 horas. La comparación del grupo de clotrimazol después de 24h y 48h mostró que había una diferencia significativa entre el recuento de células fúngicas para diluciones de 1/10, 1/20, 1/40, 1/80 y 1/160, respectivamente,,,, y, y su promedio en 48h fue inferior a 24h. En el grupo de lavanda , se observó una diferencia significativa entre los dos períodos solo para diluciones de 1/20 y 1/80 . Además, en este grupo, el recuento promedio de células fúngicas también fue menor después de 48h, pero para la dilución 1/10, el recuento promedio de células fúngicas después de 48h fue mayor que las más diluciones. Algunos medicamentos son más eficaces con diluciones más bajas.
4. Discusión
Con el aumento del tratamiento de hongos resistentes a los medicamentos en los últimos años y los efectos adversos de los agentes antimicóticos, la necesidad de nuevos medicamentos se ha vuelto importante. En el presente estudio, se ha demostrado que la hierba lavanda tiene actividad antimicótica. Los estudios sobre los efectos antimicóticos de la lavanda fueron diferentes. La lavanda tuvo un efecto inhibidor muy débil de los hongos en algunos estudios, pero, en la mayoría de los casos, su efecto antimicótico fue significativamente positivo . Devkatte et al. en un estudio sobre aceites a base de hierbas como inhibidores potenciales del crecimiento de Candida albicans, el objetivo fue determinar la concentración inhibitoria mínima y la concentración fungicida mínima de 38 esencias de aceites a base de hierbas. Informaron que el aceite de canela era el mejor y tuvo el impacto de la concentración de fungicidas del 0.03 por ciento contra 4 cepas de cándida. La mayoría de los aceites se ubicaron en el grupo moderado y 9 aceites fueron los menos efectivos en los que la lavanda se consideró en el grupo menos efectivo . Mahboubi et al. informó que la lavanda tiene una actividad antimicótica moderada, mientras que otros aceites esenciales, como el tomillo y el geranio, tienen fuertes efectos antimicóticos. Mahboubi demostró que algunos aceites esenciales eran más efectivos contra las cepas de candida . Básicamente, el aceite de lavanda tiene una larga historia de uso medicinal en la Medicina Tradicional China (MTC) y tiene actividad antimicrobiana contra hongos y bacterias . Varias combinaciones como acetato de linalilo, linalol, ácido butírico y ácido propiónico están involucradas en esta actividad . En un estudio similar se demostró que el aceite esencial de Lavandula angustifolia y sus componentes principales, linalol y acetato de linalilo, pueden matar o inhibir el crecimiento de hongos . Los datos mostraron una diferencia significativa entre los tres grupos de lavanda, clotrimazol y control en diluciones más altas (1/40 y 1/160) para la actividad antifúngica. El recuento de células fúngicas en el grupo de lavanda fue menor que en los otros grupos. Behmanesh et al. informó que el recuento de células fúngicas en tubos que contenían infusión de lavanda y esencia de lavanda era menor que los tubos de clotrimazol. Además, los efectos antifúngicos más efectivos de los medicamentos (recuento de células fúngicas más bajo) se observaron a diluciones más altas . En su estudio, D’Auria et al. se encontró que las diluciones más altas de lavanda inhiben la formación de hongos y el alargamiento de las fibras y reducen el crecimiento de hongos y su tasa de difusión en el tejido.
Los resultados de la comparación entre los dos grupos de lavanda y clotrimazol mostraron que el recuento de células fúngicas después de 24h, para diluciones de 1/20 y 1/40 y 1/160, tuvo diferencias significativas. En estas diluciones, el recuento de células fúngicas en la lavanda fue menor que el clotrimazol. En un estudio similar, se demostró que, en todas las diferentes diluciones, el clotrimazol tenía los efectos antifúngicos más bajos y el recuento de células fúngicas más alto. En este estudio, encontramos que la infusión de hierba lavanda y su esencia en comparación con el clotrimazol tiene una mayor actividad antimicótica contra C. albicans .
Los datos de comparación de los grupos clotrimazol y control mostraron diferencias significativas en las concentraciones de 1/40 y 1/160 entre los dos grupos. Gharibi et al. en su estudio compararon el uso simultáneo de fluconazol y clotrimazol con dosis frecuentes en el tratamiento de la candidiasis recurrente y mostraron que los dos métodos para reducir las quejas y los síntomas de picor, rascado, edema, eritema y fisuras fueron muy efectivos dos semanas después del tratamiento () y los síntomas de la candidiasis vaginal también se redujeron en 6 semanas de tratamiento en el grupo de intervención y tuvieron una diferencia significativa en el grupo de control ().
Los hallazgos de la investigación sobre los cambios entre los grupos según la misma dilución pero después de 24h y 48h en el grupo de clotrimazol mostraron que, para diluciones de 1/10, 1/20, 1/40, 1/80 y 1/160, hubo una diferencia significativa entre los dos recuentos de células fúngicas en los que su promedio fue mayor en 24h que en 48h. el recuento de células fúngicas fue menor después de 48h. Ghahramanlo et al. se realizó un estudio similar y se demostró el aumento de los efectos antifúngicos en las resinas acrílicas al aumentar la concentración y el tiempo de nanopartículas en comparación con los microorganismos de contacto.
5. Conclusión
De acuerdo con los resultados de este estudio y la información registrada en los libros antiguos de hierbas medicinales de Irán, podemos obtener información adicional con más investigaciones para apoyar la efectividad de la lavanda.
Conflicto de Intereses
Los autores no tienen ningún conflicto de intereses.
Reconocimiento
Los autores agradecen al Adjunto de Investigación y Tecnología de la Universidad de Ciencias Médicas de Babol por el apoyo financiero.