Taq DNA-polymerase, isolert Fra Thermus aquaticus, er en termostabil DNA-polymerase som katalyserer den primeravhengige inkorporeringen av nukleotider i dupleks DNA i 5’→3 ‘ – retningen i nærvær Av Mg2+. Det er standard termostabil DNA-polymerase som brukes I PCR-applikasjoner. Taq har ikke 3 ‘→5’eksonukleaseaktivitet, men har 5’→3 ‘ eksonukleaseaktivitet. Taq polymerase er egnet for DE FLESTE PCR-applikasjoner som ikke krever et hi-fi-enzym, for eksempel å oppdage spesifikke DNA-eller RNA-sekvenser. EN typisk polymerasekjedereaksjon (PCR) inkluderer mål-DNA, en termostabil DNA-polymerase som Taq-polymerase, to oligonukleotidprimere, dntp-er, reaksjonsbuffer og magnesium. Når den er montert, blir reaksjonen plassert i en termisk syklus, som utsetter reaksjonen for gjentatte sykluser av temperaturendringer der DNA er denaturert, primere anneal til målet og forlenges av polymerasen for å lage en kopi AV DNA-strengen. HVER PCR-syklus dobler teoretisk mengden målrettet sekvens i reaksjonen til reaksjonskomponentene blir begrensende eller forbrukes.
i endepunkt PCR skjer analyse etter at ALLE sykluser AV PCR er fullført og forsterkningsreaksjonen har nådd et platå (eller endepunkt). Dette står i kontrast til qpcr i sanntid, hvor PCR – produktdannelse overvåkes i sanntid etter hvert som forsterkningsreaksjonen oppstår. Endpoint PCR er en kvalitativ metode. Det er mye brukt til mange formål, inkludert å bestemme tilstedeværelsen eller fraværet av en bestemt DNA-sekvens i en målprøve, oppdage patogener, forsterke målsekvenser for videre analyse og oppdage spesifikke DNA-sekvenser for å identifisere individer eller celletyper. PCR Master Mikser inneholder alle reaksjonskomponenter FOR PCR, inkludert Taq polymerase, dNTPs og optimalisert buffer. Master mikser forenkle eksperimentell oppsett og spare tid, som brukeren bare trenger å legge til mal og primere til reaksjonen.