Eksperimentell Og Terapeutisk Medisin

Innledning

ET SANNTIDS celleovervåkingsanalyse (RTCA) system ble tidligere utviklet for kontinuerlig overvåking av adherente cellekulturer (1). Denne etikettfrie og ikke-invasive metoden er basert på måling av den elektriske impedansen (celleindeks, CI) mellom interdigiterte regioner påbase av vevskulturplater. CI-måling girkvantitativ informasjon om den biologiske statusen til adherentcells. Faktisk er betydningen AV CI antall overlevelsescellerpå overflaten Av E-plate. Disse dataene inkluderer celle nummer, levedyktighet og morfologi som en sanntidsprofil (2-4). RTCAsystem er kjent for tidlig deteksjonsenhet av cellereaksjon som adynamisk fenotype mot noen reagenser (5).

i vår tidligere studie ble imatinib cytotoksisitet ved oralsquamous cell carcinoma (OSCC) vurdert ved BRUK AV WST-8(5– 3-(2- metoksy-4-nitrofenyl)- 2-(4-nitrofenyl)-2h – tetrazol – 3 – ium) analyse som anendpoint måling (6), og derettersenere MED ET RTCA-system (7).Endepunktmålinger utført AV MTT (3–2,5-difenyltetrazoliumbromid) og wst-8-analyser er vanlig brukt til å evaluere cytotoksisitet. Imidlertid er slike analyserbegrenset av variasjoner i effektene av forskjellige anticancermidlerpå forskjellige cellelinjer. VIDERE HAR IC50-verdierberegnet ved in vitro endepunktanalyser en tendens til å være høyere enn de effektive konsentrasjonene in vivo (8,9).

I vår tidligere studie VAR IC50-verdiene målt av RTCA-systemet lavere enn de som ble målt ved wst-8-analysen, noe som tyder på AT RTCA-systemet kan sensitivtevaluere cytotoksisitet og påvirkning av imatinib på celladhesjon. Det er imidlertid uklart om evaluering av ic50-verdier av Andre anticancermidler som bruker Rtcasystemet, vil være nyttig fordi det er forskjeller i cytotoksiskreaksjoner mellom molekylære målrettede legemidler som imatinib og anticancermidler over tid.

i denne studien må vi velge noen type cellelinjer for å bestemme forskjellen i cellereaksjonprofil mot anticancerreagenser i sanntid ved HJELP AV RTCA-system.Ikke-invasiv SQUU-a cellelinje og invasiv SQUU-B cellelinje som ble etablert fra lokale tilbakevendende tunge kreftvulster i asingle pasient, ble valgt fordi vi var engasjert i forskning ved metastase AV SQUU – b cellelinje ved HJELP AV SQUU-a cellelinje og SQUU-Bcell linje (10-12). SAS cellelinje ble etablert fradårlig differensiert humant squamouscellekarsinom i tungen(13). NA cellelinje ble etablertsom en fibronektinproduserende cellelinje (14). Videre har det blitt rapportert at CYTOTOKSISITET av anti-kreft reagenser I OSCC har blitt evaluert I SQUU-a cellelinje OG SQUU-b cellelinje (15), SAS cellelinje (16), NA cellelinje (17) ved hjelp av ulike konvensjonelle metoder.Derfor valgte vi fire disse cellelinjene med hverkarakteristisk trekk i denne studien, som også ble brukti cytotoksisk analyse i tidligere studie.i denne studien fokuserte vi på EN NY RTCA-enhet utviklet for sanntidsmåling og evaluerte ic50-verdiene som en skala for å vurdere cytotoksisiteten til fire anticancermidler mot I fire OSCC-cellelinjer. Dette tillot oss å få informasjon om variasjonene observert mellom de forskjellige anticancer reagenser og cellelinjer inreal-time.

målet med denne studien var å oppnå 50 profiler fra umiddelbart etter tilsetning av anticancer midler ved BRUK AV ET RTCA-system. Denne studien viste fordelene ved å evaluere cytotoksisiteten til anticancermidler ved BRUK AV ET RTCA-system sammenlignet med en endepunktanalyse.

Materialer og metoder

Reagenser og materialer

5-Fluorouracil (5-FU) ble fortynnet til 100 mM indimetylsulfoksid (DMSO; Sigma-Aldrich Inc., St. Louis, MO, USA).Doxifluridin og karboplatin ble fortynnet til henholdsvis 100 og 50 mM i destillert vann. Docetaksel ble fortynnet til 10 mM inetanol. Alle anticancer reagenser ble hentet fra Wako PureChemical Industries, Ltd., (Osaka, Japan) og lagret hos -20°C.

Cellekultur

Menneskelige OSCC cellelinjer SQUU-A, SQUU-B, SAS og NAwere avledet fra menneskelige tunge prøver. SQUU-a OG SQUU-B, som Ble levert Av Morifuji-Wilson M (Kumamoto University, Kumamoto, Japan), ble etablert fra lokale tilbakevendende tonguecancer svulster (18). SAS (13,19,20) varkjøpt fra Riken BRC Cellebank (Tsukuba, Japan). NA(14) ble vennlig levert Av Dr. Jun-Ichi Iwata (Kyushu University; Fukuoka, Japan). Alle cellelinjerble opprettholdt I Dulbeccos modifiserte Eagle ‘ s medium (DMEM; Nacalai Tesque, Inc., Kyoto, Japan) som inneholder 10% føtalt kalveserum (Biowest, Nuaille, Frankrike) ved 37°C i fuktig atmosfære med 5% CO2.

Måling AV OSCC-celleproliferasjon ved RTCA-cytotoksisitetsanalysen

CI ble anskaffet av Icelligence-systemet (ACEABiosciences, Inc., San Diego, CA, USA) SOM RTCA-systemet. Allmonitoring ble utført ved 37°C med regulert Co2-Innhold (5%). E-plater (kulturplater for iCELLigence-systemet)som inneholdt 200 µ kulturmedium per brønn ble equilibrated to37°C, og CI ble satt til null under disse forholdene. Celler (2×104 celler/brønn med mindre annet er spesifisert) ble lagt tili 560 µ kulturmedium Anticancermidler ble lagt til ved 24 timer etter sådd av cellene. KI ble overvåket i sanntid for 96 timer ettercellesåing. IC50-verdiene ble beregnet Av RTCAData Analysis Software versjon 1.0 (ACEA Biosciences, Inc.).Åtte poeng konsentrasjon av fire anticancerreagents ble satt basert På Cmax verdier i forrige studie (21-25). Videre ble tidspunkter angitt i 72 timer, inkludert 24 timer og 48 timer, som var en generell metode for å evaluere cytotoksisitet i endepunktanalyse.

Kurvetilpasning Av IC50data

Vi brukte følgende sigmoidal dose-responseformula for å beregne IC50-verdiene: Y = Low CI + (HighCI-Low CI) / {1 + 10 ^ (Log IC50-X)}, hvor ‘Low CI’ representerer minimum CI-verdiene, ‘High CI’ representerer maksimumcellindeksverdiene, Y er celleindeksen, Og X er loggen for konsentrasjon (M).

Måling AV OSCC-celleproliferasjon ved wst-8-analysen

etter første sådd og kultur AV OSCC-celler ble kulturmediet fjernet og erstattet med antikanceragentholdig medium. Etter inkubasjonstid på 24, 48 og 72 timer ble 20µ WST-8 fargestoff (Celletellingssett-8; Dojindo Corporation, Tokyo,Japan) tilsatt til hver brønn. Etter 3 timer ble platene lest på450 nm / 655 nm. Celleoverlevelsesraten ble beregnet ved hjelp av formelen nedenfor (7). Ic50-verdier ble beregnet ved lineær tilnærming regresjon av prosentvis overlevelse versus legemiddelkonsentrasjonen.

celleoverlevelsesrate (%) =(a-c)/(b-c) ×100 (a=absorbans ved hver konsentrasjon av kreftreagensen, b = absorbans ved 0 µ av kreftreagensen og c=absorbans av blankt).

Statistisk analyse

alle data er vist som gjennomsnittlig ± standardavvik (SD) av tre uavhengige eksperimenter. Korrelasjoner mellomic50-verdier oppnådd ved BRUK AV RTCA-systemet og WST-8assay ble evaluert for statistisk signifikans av Spearmantest. To-tailed verdier Av P < 0,05 ble vurdert assignificant.

Resultater

effekt av kreftmiddelkonsentrasjon på OCC-celleproliferasjon ved BRUK AV RTCA-systemet

vi evaluerte cytotoksisiteten til fire anticancerreagenter (5-FU, doksifluridin, karboplatin og docetaksel) i fourOSCC-cellelinjer ved å overvåke CI-verdiene for 96 timer etter at cellene ble sådd ved 2×104 celler/brønn på E-plater(Fig. 1–4). CI-verdiene ble redusert på adoseavhengig måte i alle FIRE OCC – cellelinjene. Derfor er reduksjon I CI-verdier korrelert med reduksjonen i cellen number.As vist I Fig. 2, CI-verdien forinvasive SQUU – b cellelinjen var lavere enn for andre OSCC cells.As vist I Fig. 3, CI profileobtained FOR SAS celle linje viste forsinket økning etter 48 h. Asshown I Fig. 4, frekvensen av spredning og maks CI-verdi I NA-cellelinjen var høyere enn en av andre cellelinjer.

sanntidsmåling av ic50-profiler av anticancermidler i OSCC-celler ved BRUK AV RTCA-systemet

IC50-profilene til de fire anticancerreagentene i DE fire OSCC-cellelinjene ble bestemt Av Rtcasystemet og beregnet av den kommersielle programvaren som følger medinstrument (EN delmengde AV SQUU-B-dataene er vist I Fig. 5). IC50-verdiene varplottet for 72 h etter tilsetning av anticancermidler. Denic50 verdier ved 24, 48 og 72 h for alle fire cellelinjer er oppsummert I Tabeller I-IV. Som vist I Fig. 5, det var tidsforsinkelse i cytotoksiskreaksjoner av 5-FU(Fig. 5A) anddocetaxel (Fig. 5D), and recovery ofcell proliferation was observed at about 24 h after treatments.However, cytotoxic reactions were observed immediately aftertreatment with anticancer agents such as doxifluridine (Fig. 5B) and carboplatin (Fig. 5C).

Dose-response curves in SQUU-B cell line using RTCAsystem were shown in supplemental materials (Figs. S1–S4) in order to show how to conversion thedata of Fig. 2 into Fig. 5. Mens celleviabilitetskurver ofSQUU-B ved BRUK AV WST-8-analyse ble også vist i supplerende materialer (Fig. S5-S8). R2-verdier ved 72 h ettertilsetning anticancerreagenser I wst-8-analysen var lave i fireanticancerreagenser sammenlignet med en av 24 h og 48 h. Disseresultatene viste at det er ønskelig at endepunktsanalysen ble utført ved 24 h eller 48 h for å bli brukt som en generell protokoll. I thisstudy, celle levedyktighet kurver AV wst-8 assay ble vist isupplementale materialer fordi det var ingen nyhet i hvordan tocalculation AV IC50 verdier ved HJELP AV wst-8 assay.

Korrelasjoner mellom sanntidsmålinger AV IC50-verdier ved HJELP AV RTCA-systemet andendpoint-målinger AV IC50-verdier ved HJELP AV WST-8-analysen i OSCC-celler

som vist I Fig. 6, IC50-verdier ved 24, 48 og 72 h ved hjelp av to metoder ble plottet. Den horisontale aksen viser IC50-verdier i SANNTID målt ved HJELP AV RTCA-systemet, mens lengdeaksen viser ic50-verdier målt ved HJELP AV wst-8-analysen. Apositiv korrelasjon ble observert mellom de to typer analysemetode for å måle IC50 for hvert anticancermiddel.Resultatene av 5-FU, doxifluridin, karboplatin og docetaxcelwere y=8,19 x+346,02 (R2=0,94, rs=0,66, *P<0,05), y=1,00 x+172,70(R2=0,91, rs=0,82, **P<0,01), y=1,90 x+206,81 (r2=0,92,rs=0,96, **p<0,01), andy=13,53 x+0,08 (r2=0,95, rs=0,73, *p<0,05), henholdsvis. Real-timeIC50 verdier tendens til å være lavere enn de tilsvarendpoint IC50 verdier.

Diskusjon

CI-verdier beregnet AV RTCA er ogsårepresenterer cellestatusen (3). Drittsekk i Fiken. 1-5, SD-verdier AV CI-verdier var for små tilse. For eksempel er ALLE SD-verdier I Fig.1 var under 0,05. Årsaken til lave CI-verdier AV SQUU-B varforeslo at adhesjonsproteinet E-cadherin spiller en vesentlig rolle i metastase, med reduserte nivåer Av e-cadherin som fremmer cellemigrasjon og celleinvasjon (26). Årsaken til høye max CI-verdier ofNA ble antydet at det har blitt rapportert at fibronektinakselerert celleproliferasjon og adhesjon på grunn av funksjonen ofNA cellelinje som en fibronektinproduserende cellelinje (6). Dermed cellereaksjoner av hver cellelinjermot fire anticancer reagenser var variable. Vi kunne ikke finne årsakssammenheng MELLOM IC50-verdier og funksjonen av cellelinjer i denne studien. Det er imidlertid viktig å oppdage en cellereaksjon i sanntid som EN CI-profil for å evaluere cytotoksisitet av anticancerreagens ved vurdering av farmasøytisk anvendelse på mennesker.

IC50-profilen til SQUU-b-cellelinjen varbeskrevet I Fig. 5 som arepresentative IC50 profil fordi det var nodifferences I IC50 profil mønster i samme cellelinje incase av samme reagens, selv om vi beregnet IC50 valuesin alle cellelinje ved hjelp av fire anticancer reagenser. Vi fant at theIC50 profiler varierte for hver anticancer agent og ineach OSCC cellelinje. Som vist I Fig.5, 5-FU og docetaksel krevde mer enn 24 timer(48 timer i figuren) for å begynne å utøve en cytotoksisk effekt PÅ OSCC-cellene,MENS IC50-verdiene hadde gjenvunnet fra ca. 24 timer (48 timer i figuren) etter tilsetning av doksifluridin og karboplatin. Dermed foreslo vi at forskjellene i sanntidic50 profiler ble forårsaket av anticancer reagens. Suchobservations ville ikke vært mulig uten sanntidmåling ved HJELP AV RTCA. Sanntidsovervåking av theIC50-verdiene viste også at disse verdiene endret seg markant over tid. Det er mulighet for ikke å oppdageendringer ved hjelp av konvensjonelle metoder, fordi BARE ETT tidspunktc50 ETTER behandling med anticancermiddelet er evaluert ved en endepunktanalyse.RTCA systemet er i motsetning til tradisjonelle endpointassays være fordi måling av impedans er ikke-invasiv andcan gi høy kvalitet, kvantitative data på cytotoksisitet i acontinuous måte. Som vist I Fig.6, det var signifikante positive korrelasjoner mellomic50 verdier oppnådd MED RTCA-systemet OG WST-8assay, selv om det var noen forskjeller i absolutte verdier AV CI som lave ci verdier oppnådd FOR SQUU – b cellelinje. Disse resultatene antydet at selv et lavt CI oppnådd for noen cellelinjerville kunne evaluere cytotoksisiteten høy følsomhet I RTCAsystem. Mens real-time IC50-verdiene var lavere ennendpoint IC50-verdier når real-time Ic50-Verdiene oppnådd med RTCA-systemet ble sammenlignet medendpoint IC50-verdiene oppnådd MED WST-8-analysen.Disse resultatene tyder på AT RTCA-systemet kan brukes tilsensitivt vurdere effekten av anticancermidler på cellespredning og adhesjon.

I RTCA-systemet fungerer adherent celle som en isolator på elektrodens overflate og endrer det ioniske mediumet tilelektrode-løsningen, og øker impedansen (27). DERMED ER CI funksjon av cellenantall og forhold mellom celler ved forskjellige tidsintervaller. CI = 0 nårdet er ingen celleadhesjon (5). CIchanges beskrevet AV RTCA-systemet reflekteres dynamisk fenotype avcelle. Denne dynamiske overvåkingen av celle-legemiddelinteraksjon gjør det mulig for oss å få en bedre forståelse av temporale effekter invitro, spesielt umiddelbart etter behandling med legemiddel(28). Den kinetiske trekk ved thecells tilbyr innsiktsfull informasjon som ikke kan skaffes fra aconventional enkelt endepunktanalyse som WST-8 analyse. Mens resultatene AV wst-8-analysen reflekteres metabolsk reaksjon av survivalcell (29). Toksisitet VED BRUK AV WST-8-analyse kan undervurderes dersom cellemetabolismen ble gjenvunnet selv om dynamisk cellereaksjon ble inntruffet. Vi suggestedthat disse forskjellene av rektor i to metoder ble indusert a store forskjeller I IC50 verdi opp til 8 ganger mellom twomethods som vist I Fig. 6A. Ourtidligere studie rapporterte AT IC50 av imatinib i SQUU-Aceller beregnet av RTCA-system og WST-8-analyse var henholdsvis 4 µ og 60µ (følsomhet av 15 ganger) (6,7). Andre forskningsgrupper rapporterte AT IC50 av cisplatin i HK-2celler beregnet av RTCA-systemet og WST-8-analysen var henholdsvis 0.76 µ og 25µ (følsomhet av 33 ganger) (30,31).Disse tidligere dataene støttet våre data for å vise gyldighet.

det er viktig å oppnå målinger fraumiddelbart etter behandling med anticancermidler for å vurdere beggebivirkningene av midlene og dens ønskede effekter. Det er imidlertid få rapporter om nyttige metoder som korrelerer invitro-data med menneskelige in vivo-data. Vi vurderte det sanntidsmåling ved HJELP AV RTCA-systemet ville være til nytte forevaluering av bivirkningene av anticancermidler i normalceller.

tidligere rapporterte Cmax-verdier av 5-FU, doksifluridin, karboplatin og docetaksel er 60 (21), 40-800 (22), 40 (23), og henholdsvis 2 µ (24,25) ved intravenøs behandling hos mennesker. Våre data korrelerte med humane data fordi Cmax-Verdiene ble inkludert i området for de eksperimentelle dosene som ble brukt i denne studien.RTCA-systemer er den nye hovedinnretningen for å evaluere cytotoksisitet, som benytter impedansintensiteten av celladhesion og ikke enzymaktivitet i målceller som MTTassay. IC50-verdier av anticancermidler beregnet AV RTCA-systemet var signifikant korrelert Med Ic50nivåer beregnet ved den konvensjonelle endepunktanalysen. VIDERE OPPNÅDDE RTCA-systemet målinger automatisk i sanntid umiddelbart etter behandling med anticancermidler.FAKTISK KAN IKKE RTCA-systemet evaluere direkte spesifikk cytotoksisitet som celledød eller apoptose og så videre,fordi celleindeksen ble beregnet basert på impedans. Derfor kan kombinasjonsanalysen mellom RTCA-systemet og celledødsmåling være effektiv metode ved evaluering av betongcellereaksjon som celledød eller apoptose nøyaktig.For Eksempel Kan Anneksin v-farging eller ekspresjon av caspase-3-analysefor påvisning av apoptose, Laktatdehydrogenase (LDH) frigjøringsanalyse for påvisning av celledød være effektive metoder (32,33). Videre kan det være nyttig å vurdere ekspresjon av inflammatorisk protein i normale celler for påvisning av bivirkning når anti – kreft reagens ble tilsatt til normale celler sådd På E-plate. Dynamisk sanntidsovervåking under cellekultur, inkludert anticancerreagenser, kan gi verdifulle innsikter for tidlig påvisning av terapeutisk effektivitet og sideeffekt, som ikke kan evaluere i konvensjonelle metoder i endepunktanalyse. SÅ, IC50-verdi beregnet AV RTCA-systemet kan være nyttig parameter for eksempel screening fra et synspunkt av sanntidsmåling i automatisert, unngåelse av kolorimetriskproblemer eller forurensning. VIDERE TILLATER RTCA systemanalyse av hele perioden av forsøket og krever ikkemerkingen som kan negativt påvirke cellekultureksperimenter.nyheten i denne studien er AT RTCA-systemet kunne påvise cytotoksisitet høy følsomhet sammenlignet med en konvensjonellmetode, WST-8-analyse. VIDERE KAN RTCA system evaluateIC50 verdi preciously i sanntid uten begrensning av eksperimentell periode i minst 72 h etter tilsetning av anticancer reagenser.som konklusjon viste våre resultater At Rtcasystemer er nyttige for å analysere cytotoksisitet og kunne brukes i fremtidig utvikling av kjemoterapeutiske midler ved bruk av kreftcellerog evaluering av deres bivirkninger i normale celler. I tillegg KAN ET RTCA-system brukes til å evaluere cellereaksjonsprofilene, for eksempel kombinert terapi og antistoffcelle eller legemiddelinteraksjoner, av anticancerreagenser.

Supplerende Materiale

Støttedata

Takk

ikke aktuelt.

Finansiering

ingen finansiering ble mottatt.

Tilgjengelighet av data og materialer

datasettene som brukes og / eller analyseres under den nåværende studien, er tilgjengelige fra den tilsvarende forfatteren på reasonablerequest.

Forfatternes bidrag

MH og MN utformet og utformet studien. MH andTN utførte forsøkene og kjøpte dataene. MH analyserte dataene, utarbeidet tallene og utarbeidet manuskriptet. MH, TKY andMN tolket resultatene. MH og TKY redigerte og reviderte manuskriptet. Alle forfattere har lest og godkjent finalenmanuskript.

Etikk godkjenning og samtykke tildelta

ikke aktuelt.

pasient samtykke til publisering

ikke aktuelt.

Konkurrerende interesser

forfatterne erklærer at de ikke har noen competinginterests.

	Xing JZ, Zhu L, Jackson JA, Gabos S, SunXJ, Wang XB Og Xu X: Dynamisk overvåking av cytotoksisitet påmikroelektroniske sensorer. Chem Res Toxicol. 18:154–161. 2005.View Article : Google Scholar:PubMed/NCBI
	Xing JZ, Zhu LJ, Gabos s Og Xie L: Mikroelektronisk cellesensoranalyse for påvisning av cytotoksisitet og prediksjon av akutt toksisitet. Toksikol In Vitro. 20:995–1004. 2006.View Article : Google Scholar: PubMed/NCBI		Zhu J, Wang X, Xu X Og Abassi YA: Dynamicand etikett-fri overvåking av naturlig killer celle cytotoksisk aktivitetved hjelp av elektroniske celle sensor arrays. J Immunol Metoder. 309:25–33.2006. Vis Artikkel : Google Scholar: PubMed/NCBI		Xi B, Yu N, Wang X, Xu X Og Abassi YA: anvendelsen av cellebasert etikettfri teknologi i drugdiscovery. Biotechnol J. 3:484-495. 2008. View Article: Google Scholar: PubMed/NCBI		Tü Sener L, Albeniz G, Dinc B andAlbeniz I: iCELLigence sanntids celleanalysesystem for undersøkelsecytotoksisitet av legemidler til kreftcellelinjer. Exp Ther Med.14:1866–1870. 2017. View Article : Google Scholar : PubMed/NCBI		Morioka M, Hazekawa M, Kawakubo-YasukochiT, Nishinakagawa T, Nakamura S Og Nakashima M: effekt av kollagentype I eller humant fibronektin på imatinib cytotoksisitet I Muntligkvamcellekarsinom. Pharmacol Pharm. 7:255–263. 2016.Vis Artikkel : Google Scholar
	Hazekawa M, Morioka M, Nishinakagawa T,Kawakubo – Yasukochi T, Nakamura S Og Nakashima M: Vurdering avcytotoksisitet av imatinib for oralt plateepitelkarsinom ved arealtidcelleanalysesystem. eJBio. 13:56–62. 2017.
	McEneny-King A, Edginton AN OG Rao PP:Undersøker bindingsinteraksjonene mellom Anti-Alzheimers legemiddeldonepezil MED CYP3A4 og P-glykoprotein. Bioorg Med Chem Lett.25:297–301. 2015. Vis Artikkel: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Ota T, Shinotoh H, Fukushi K, Kikuchi T,Sato K, Tanaka N, Shimada H, Hirano S, Miyoshi M, Arai H, et al:Esyimering av plasma IC50 av donepezil for cerebralacetylkolinesterasehemming hos pasienter med alzheimers sykdomved hjelp av positronutslippstomografi. Clin Neurophaemacol. 33:74–78.2010. Se Artikkel : Google Scholar
	Kawakubo-Yasukochi T, Morioka M, HayashiY, Nishinakagawa T, Hazekawa M, Kawano S Nakamura S Og NakashimaM: SQUU-b-cellelinjen sprer sine metastatiske egenskaper tononmetastatisk.clone Squu-a fra samme pasient gjennom eksosomer.J Oral Biosci. 58:33–38. 2016. Vis Artikkel : Google Scholar
	Morioka M, Kawakubo-Yasukochi T, HayashiY, Hazekawa M, Nishinakagawa T, Ono K, Kawano S, Nakamura s andNakashima m: Eksosomer fra orale karsinomcellelinjer,SQUU-a og SQUU-B, definerer tropismen av lymfatisk spredning. JOral Biosci. 58:180–184. 2016. Vis Artikkel : Google Scholar
	Kawakubo-Yasukochi T, Morioka M, HazekawaM, Yasukochi A, Nishinakagawa T, Ono K, Kawano S, Nakamura s andNakashima m: miR-200c-3p sprer invasiv kapasitet i humant oralsquamous cellekarsinom mikromiljø. Mol Karsinog. 57:295–302.2018. ViewArticle: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Takahashi K, Kanazawa H, Akiyama Y, TazakiS, Takahara M, Muto T, Tanzaawa H Og Sato K: Etablering ogkarakterisering av en cellelinje (SAS) fra dårlig differensiertmenneskelig plateepitelkarsinom i kroppen.tungen. J Jpn Stomatol Soc.38:20–28. 1989.
	Yoshiya M: en fibronektinproduserende cellelinje etablert fra et humant plateepitelkarsinom i tungenog dens karakterisering. Jpn J Oral Maxillofac Surg. 36:868–880.1990. View Article : Google Scholar
	Tanaka H, Toyoshima T, Sonoda K, KitamuraR, Sasaguri M, Kawano S, Matsubara R, Goto Y Og Nakamura S:Apoptotisk funksjon av tumorassosiert antigen RCAS1 i oralsquamous cellekarsinom. J Transl Med. 12:1122014. Vis Artikkel : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Chien MH, Chang WM, Lee WJ, Chang YC, LaiTC, Chan DV, Sharma R, Lin YF Og Hsiao M: Et fas-ligand(FasL)-smeltet humanisert antistoff mot tumorassosiertglykoprotein 72 utviser selektivt den cytotoksiske effekten motoral kreftceller med lavt FasL/Fas-forhold. Mol Kreft Ther.16:1102–1113. 2017. View Article : Google Scholar : PubMed/NCBI		Takaoka S, Iwase M, Uchida M, Yoshida S,Kondo G, Watanabe H, Ohashi M, Nagumo M Og Shintani S: Effekt avkombinere epidermal vekstfaktor reseptorhemmere og Cisplatinon Proliferasjon Og Apoptose av orale plateepitelkarsinomceller. Int J Oncol. 30:1460–1476. 2007.
	Morifuji M, Taniguchi S, Sakai H, Nakabeppu Y Og Ohishi M: Differensiell ekspresjon av cytokeratinetter orthotopisk implantasjon av nyetablerte humane tonguecancer cellelinjer med definert metastatisk evne. Am J Pathol.156:1317–1326. 2000. Vis Artikkel: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Hang CM, Chang CC, Lin CW, Ko SY og HsuYC: Cucurbitacin E som induktor av celledød og apoptose i humanoral plateepitelkarsinom cellelinje SAS. Int J Mol Sci.14:17147–17156. 2013. Vis Artikkel : Google Scholar : PubMed/NCBI		Chen YW, Huang HS, Shieh YS, Ma KH, HuangSH, Hueng DY, Sytwu HK OG Lin GJ: en ny sammensatt NSC745885exerts antitumoreffekt På Tunge Kreft Sas Celler In Vitro Og invivo. PLoS One. 9: e1047032014. Vis Artikkel: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Casale F, Canaparo R, Serpe L, Muntoni E, Pepa CD, Costa M, Marirone L, Zara GP, Fornari G Og Eandi M:Plasmakonsentrasjoner av 5-fluorouracil Og dets metabolitter ikolon kreftpasienter. Pharmacol Res. 50: 173-179. 2004. Vis Artikkel : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Van Der Heyden SA, Highley MS, De BruijinEA, Tjaden UR, Reeuwijk HJ, Van Slooten H, Van Oosterom AT Og MaesRA: Farmakokinetikk og biotilgjengelighet av oral5 ‘ – deoksy-5-fluorouridin hos kreftpasienter. Br J Clin Pharmecol.47:351–356. 1999. View Article : Google Scholar
	Kern W, Braess J, Friedrichsen S, KaufmannCC, Schleyer E Og Hiddemann w: karboplatin farmakokinetikk pasienter som får karboplatin og paklitaksel/docetaksel foravansert lungekreft: Påvirkning av alder og nyre funksjon På Områdetunder kurven. J Kreft Res Clin Oncol. 127:64–68. 2001.Vis Artikkel: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Kenmotsu h Og Tanigawara Y:Farmakokinetikk, dynamikk og toksisitet av docetaksel: Hvorfor den japanske dosen er forskjellig fra den vestlige dosen. Kreft Sci.106:497–504. 2015. View Article : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Minami H, Kawada K, Sasaki Y, Igarashi T,Saeki T, Tahara M, Itoh K Og Fujii h: Farmakokinetikk ogfarmakodynamikk av protein-ubundet docetaksel hos kreftpasienter.Kreft Sci. 97:235–241. 2006. Vis Artikkel : Google Scholar : PubMed/NCBI		Zhao P, Guo S, Tu Z, Di L, Zha X, Zhou Hånd Zhang X: Gihl3 induserer menneskelig epitelial tumorcellemigrasjon og invasjon via nedregulering Av E-cadherin. Acta Biochim BiophysSin (Shanghai). 48:266–274. 2016. Vis Artikkel: Google Scholar : PubMed/NCBI		Szulccek R, Bogaard HJ og van NieuwAmerogen GP: Elektrisk celle-substrat impedans sensing for thequantification av endotel spredning, barrierefunksjon, andmotility. J Vis Exp. 28.-2014. ViewArticle: Google Scholar		Ku M, Kang M, Suh JS Og Yang J: Effekterfor sekvensiell behandling av siAkt og paklitaksel på magekreftlinjer. Int J Med Sci. 13:708–716. 2016. Vis Artikkel : Google Scholar: PubMed/NCBI		Feng Z, Wang Z, Yang M, Zhou L Og Bao Y:Polysaccharopeptide exerts immunoregulatory effects viaMyD88-dependent signaling pathway. Int J Biol Macromol. 82:201–207.2016. View Article : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Genc G, Kilinc V, Bedir A and Ozkaya O:Effect of creatine and pioglitazone on Hk-2 cell line cisplatinnephrotoxicity. Ren Fail. 36:1104–1107. 2014. View Article : Google Scholar : PubMed/NCBI
	Ng NS, Wu MJ, Myers SJ and Aldrich-WrightJR: In vitro nyrecelletoksisitet av enkelte ukonvensjonelle kreftfenantrolinbaserte platina (II) cpmplekser. J lnorgBiochem. 179:97–106. 2018. Vis Artikkel : Google Scholar
	Ma K, Zhang C, huang MY, Guo YX og Hu GQ:Krysstale Mellom Beclin-1-avhengig autofagi ogcaspaseavhengig apoptose indusert av transhinon IIA I HUMANOSTEOSARCOMA MG-63 Celler. Oncol, Rep. 36:1807-1818. 2016. Vis Artikkel: Google Scholar : PubMed/NCBI
	Augustine D, Rao RS, Anbu J and ChidambaraMurthy KN: In vitro cytotoxic and apoptotic induction effect ofearthworm coelomic fluid of Eudrilus eugeniae, Eisenia foetida, andPerionyx excavatus on human oral squamous cell carcinoma-9 cellline. Toxicol Rep. 6:347–357. 2019. View Article : Google Scholar : PubMed/NCBI