La doble recíproco ecuación se obtiene tomando el recíproco de ambos lados de la ecuación de Michaelis-Menten. La gráfica de doble reciprocidad (también conocida como Lineeweaver-Burk) se crea trazando la velocidad inicial inversa (1/V0) en función de la inversa de la concentración del sustrato (1/). El Vmax se puede determinar con precisión y, por lo tanto, KM también se puede determinar con precisión porque se forma una línea recta. La pendiente de la línea resultante es KM / Vmax, la intersección en y es 1 / Vmax y la intersección en x es -1 / km. Usando la ecuación de Michaelis-Menten, la Vmax es una asíntota y, por lo tanto, solo se puede aproximar y, como resultado, la KM, que es Vmax/2, no se puede determinar con precisión. Esta gráfica es una forma útil de determinar diferentes inhibidores, como competitivos, no competitivos y no competitivos.
Para los inhibidores competitivos, el inhibidor compite con el de la molécula de sustrato para enlazar con el sitio de unión. En consecuencia, el KM aumentará sin cambiar el valor Vmax. Esto significa que los dos gráficos tendrán la misma intersección en y como se muestra a continuación. Sin embargo, la nueva intercepción x puede ser bastante esquiva. Para este tipo de inhibidores, se necesita una mayor concentración del sustrato para ocupar la mitad de los sitios activos. Por lo tanto, KM2 será más grande que KM1. Esto se traduce en un valor recíproco de KM1 más alto que el de KM2. Sin embargo, la intersección en x tiene el signo negativo delante de ella, por lo que en el gráfico tiene que moverse a la derecha en relación con la intersección anterior. Para mostrar esto en la gráfica de doble reciprocidad, la pendiente aumentará para mostrar la fuerza del inhibidor competitivo de unión. Mientras que la pendiente aumenta con la presencia del inhibidor, la intersección en y permanece igual en presencia y ausencia del inhibidor.
Para inhibidores no competitivos, el inhibidor solo se unirá a un complejo de sustrato enzimático; por lo tanto, no compite con el sustrato para el sitio de unión. En consecuencia, los valores de KM y Vmax disminuyen. Consecuentemente, el valor recíproco de la nueva Vmax debe estar en una posición más alta en el eje, ya que una fracción se hace más grande cuando el denominador se hace más pequeño. El nuevo valor recíproco de KM se moverá hacia la izquierda y la explicación debería ser similar a la del inhibidor competitivo. Para mostrar esto en una gráfica de doble reciprocidad, la pendiente seguirá siendo la misma que si la enzima no estuviera unida al inhibidor, pero la intersección del eje x disminuirá. La gráfica de doble reciprocidad para la enzima con y sin inhibidor no competitivo será de dos líneas paralelas.
Para los inhibidores no competitivos, el inhibidor puede unirse a la enzima antes de que el sustrato pueda unirse al sitio de unión. No tiene que esperar a que la enzima se convierta en un complejo de sustrato enzimático para unirse a la enzima. La inhibición causará una disminución en el valor Vmax mientras el KM no se vea afectado. Esto significa que el valor de -1/KM sigue siendo el mismo para las dos líneas, mientras que el nuevo valor de 1/Vmax es mayor en relación con el anterior. Para mostrar esto en una gráfica de doble reciprocidad, la disminución en Vmax aumentará la intersección en y con una pendiente más grande.