Die doppel-reziproke Gleichung wird erhalten, indem der Kehrwert beider Seiten der Michaelis-Gleichung -Menten-Gleichung. Das doppel-reziproke Diagramm (auch bekannt als Lineweaver-Burk) wird erstellt, indem die inverse Anfangsgeschwindigkeit (1 / V0) als Funktion der inversen Substratkonzentration (1 /) aufgetragen wird. Die Vmax kann genau bestimmt werden und somit kann KM auch genau bestimmt werden, weil eine gerade Linie gebildet wird. Die Steigung der resultierenden Linie beträgt KM / Vmax, der y-Achsenabschnitt beträgt 1 / Vmax und der x-Achsenabschnitt beträgt -1 / KM. Unter Verwendung der Michaelis-Menten-Gleichung ist die Vmax eine Asymptote und kann daher nur angenähert werden, und infolgedessen kann die KM, die Vmax / 2 ist, nicht genau bestimmt werden. Dieses Diagramm ist eine nützliche Methode, um verschiedene Inhibitoren wie wettbewerbsfähig, nicht wettbewerbsfähig und nicht wettbewerbsfähig zu bestimmen.
Bei kompetitiven Inhibitoren konkurriert der Inhibitor mit dem Substratmolekül um die Bindung an die Bindungsstelle. Folglich erhöht sich der KM, ohne den Vmax-Wert zu ändern. Dies bedeutet, dass die beiden Graphen den gleichen y-Achsenabschnitt haben, wie unten gezeigt. Der neue X-Intercept kann jedoch ziemlich schwer fassbar sein. Für diese Art von Inhibitoren ist eine höhere Konzentration des Substrats erforderlich, um die Hälfte der aktiven Stellen zu besetzen. Daher wird KM2 größer als KM1 sein. Dies führt zu einem höheren Kehrwert von KM1 als dem von KM2. Der x-Achsenabschnitt hat jedoch das negative Vorzeichen davor, daher muss er sich in der Grafik relativ zum vorherigen Achsenabschnitt nach rechts bewegen. Um dies auf dem doppelten reziproken Diagramm zu zeigen, erhöht sich die Steigung, um die Stärke des bindungskompetitiven Inhibitors zu zeigen. Während die Steigung mit der Anwesenheit des Inhibitors zunimmt, bleibt der y-Abschnitt in Gegenwart und Abwesenheit des Inhibitors gleich.
Bei nicht kompetitiven Inhibitoren bindet der Inhibitor nur an einen Enzym-Substrat-Komplex; daher konkurriert es nicht mit dem Substrat um die Bindungsstelle. Folglich nehmen sowohl KM- als auch Vmax-Werte ab. Folglich sollte der Kehrwert des neuen Vmax an einer höheren Position auf der Achse liegen, da ein Bruchteil größer wird, wenn der Nenner kleiner wird. Der neue reziproke Wert von KM bewegt sich nach links und die Erklärung sollte der von competitive inhibitor ähneln. Um dies auf einem doppelten reziproken Diagramm zu zeigen, bleibt die Steigung dieselbe, als ob das Enzym nicht an den Inhibitor gebunden wäre, aber der x-Achsenabschnitt nimmt ab. Das doppelte reziproke Diagramm für Enzym mit und ohne nicht wettbewerbsfähiger Inhibitor sind zwei parallele Linien.
Bei nicht kompetitiven Inhibitoren kann der Inhibitor an das Enzym binden, bevor das Substrat an die Bindungsstelle binden kann. Es muss nicht warten, bis das Enzym zu einem Enzym-Substrat-Komplex wird, um an das Enzym zu binden. Die Hemmung führt zu einer Abnahme des Vmax-Wertes, während der KM nicht beeinflusst wird. Dies bedeutet, dass der Wert von -1 / KM für die beiden Linien gleich bleibt, während der neue Wert von 1 / Vmax im Vergleich zum vorherigen höher ist. Um dies auf einem doppelten reziproken Diagramm zu zeigen, erhöht die Abnahme von Vmax den y-Schnittpunkt mit einer größeren Steigung.