Abstrakt
Pozadí. Léčba infekcí kandidózy je důležitým problémem v systému zdravotní péče. Cílem této studie bylo prozkoumat in vitro účinek levandulového esenciálního oleje a klotrimazolu na izolované C. albicans z vaginální kandidózy. Materiály a metody. V této klinické studii byl získán C. albicans izolovaný ze vzorků vaginálního výboje. Test. Párové srovnání ukázalo, že levandule a klotrimazol měly významný rozdíl; tento rozdíl ve skupině levandule byl nižší než klotrimazol. Ale po 48 hodinách nebyl mezi skupinami pozorován žádný rozdíl. Mezi skupinami klotrimazolu a DMSO byl významný rozdíl. Porovnání změn mezi skupinami založen na stejném ředění, po 24 h a 48 h v klotrimazol group ukázal významný rozdíl dvou časů v houbové buňce počítat, že jeho průměru během 48 h byla méně než 24 h. Významný rozdíl byl pozorován mezi oběma obdobími ve skupině levandule, pouze při ředění 1/20 a 1/80. Průměrný počet houbových buněk po 48 hodinách byl také nižší ve skupině levandule. Závěr. Vzhledem k tomu, že levandule má antifungální aktivitu, může být použita jako antifungální látka. K ověření jeho použití při infekci candida je však zapotřebí více klinických studií.
1. Úvod
Gynekologické infekce jsou nejčastější důvody, proč ženy navštívit lékaře a požádat, aby být ošetřeny, a, v posledních letech, závažnost a výskyt houbových infekcí se zvýšil překvapivě. Jednou z onemocnění způsobených vaginální endogenní flórou je kandidóza. Odhaduje se, že 75% žen zažívá vulválně-vaginální kandidózu alespoň jednou za život. Téměř 45% žen trpí touto infekcí dvakrát ročně. Naštěstí jen malý počet žen trpí chronickými recidivujícími infekcemi. C. albicans je zodpovědný zárodek u 85-90% vaginálních kvasinkových infekcí . Včasná diagnóza a vhodná léčba záněty pochvy jsou důležité, protože selhání včas a odpovídajícím způsobem léčit tyto infekce vede k vážným komplikacím, jako jsou pánevní zánětlivé onemocnění, neplodnosti, chronické pánevní bolesti, předčasné narození, a nebezpečí infekce HIV . Jelikož počet pacientů s AIDS a cukrovku a používání antibiotik se zvyšuje každý den a vzhledem k tomu, že toto plísňové onemocnění má vysokou prevalenci u této populace pacientů, je důležité najít bezpečné a také správnou léčbu. Olejové esence se tradičně používá při léčbě a prevenci různých onemocnění a infekcí .
v současné době došlo v Americe k velkému trendu lékařské péče, kterým je používání doplňkové a alternativní medicíny. Zahrnuje řadu procedur od akupunkturních a modlitebních setkání a, co je důležitější, použití bylinných léků, které zahrnují tradiční byliny a původní rostliny z Číny, Indie, Afrika, Evropa, a Amerika. Ačkoli na těchto rostlinách nebyl proveden základní vědecký výzkum, pozadí používání bylin v minulých stoletích, stejně jako přírodní produkt, prokázalo, že se jedná o relativně bezpečnou terapii. Tato alternativní medicína byla zdůrazněna kvůli omezeným vedlejším účinkům a nízkým nákladům na její aplikaci při léčbě a prevenci chronických onemocnění .
levandule (Lavandula angustifolia), jako druh léčivé byliny, může být účinně použita při léčbě vaginálních výbojů. Levandulový esenciální olej se často používá v tradiční medicíně a jeho dopad na snížení množství houby Candida albicans byl prokázán v in vitro a klinických studiích .
na druhé straně je jedním z konvenčních chemických léků k léčbě vaginální kandidózy klotrimazol. Protože tento chemický lék má vedlejší účinky, jako je zvýšené jaterní enzymy, bolestivé močení, a deprese (vzhledem k systémové absorpci léku), a komplikace, jako jsou podráždění a pocitu mravenčení nebo kontaktní dermatitida , a vzhledem k rostoucí rezistenci na antimykotika , v této studii účinek levandule (Lavandula angustifolia) a klotrimazol vaginální kandidóza růst, in vitro byla hodnocena.
2. Metodika
V této studii vzorků byla provedena vaginálně ve sterilních podmínkách od 45 žen s klinickými příznaky vaginální plísňové infekce, kdo podle kliniky přidružené k Babol University of Lékařských Věd. Po umístění pacienta do litotomické polohy a uvedení sterilní zrcátko do pochvy, sterilní vatový tampon byl použit pro odběr vzorků ze zadní klenby a bočních stranách pochvy, a vzorek byl pak umístěn ve sterilní zkumavce. Vzorky byly testovány a dodány do mykologické laboratoře Babolské lékařské univerzity. Pouze 20 ze 45 vzorků bylo pozitivních v testu in vitro. Odkazované metody byly použity pěstování prostředí CHROMagar Candida, se tvořil zárodek trubice v lidském séru, a kukuřičná mouka agar pro výrobu chlamydospore v tomto prostředí.
V laboratoři, mokrého nátěru bylo provedeno na zjištění kvasinkové buňky hub a trichomonas infekce, kromě toho, laboratorní kultury na Sabouraud, BHI médium pro primární izolaci hub a germ tube test lidské krevní sérum s CHROMagar identifikovat druhy candida byly provedeny. Houby byly udržovány a pasážovány v Sabouraud médium pro in vitro hodnocení klotrimazol 1% a olejové esence z levandule na C. albicans byla zkoumána ve více než 20 vzorků izolovaných z 45 pacientů, s použitím buněk (macrodilution) metoda. Klotrimazol drop je jedním z hlavních léků, které se používá k léčbě plísňových infekcí v Íránu a Behvazan Společnost je jedním z několika farmaceutických společností v Íránu, které vyrábí a distribuuje této drogy. Kapka klotrimazolu byla zakoupena v lékárně v Babolu, zatímco levandulový esenciální olej byl připraven a zakoupen od společnosti Barij Essence. V této společnosti byly použity nadzemní části rostliny levandule a její esenciální olej byl odebrán společností Clevenger. Sloučeniny Lavandula angustifolia po GC (Plynová Chromatografie) byly limonen, cineol, linalool, linalyl acet. Není jasné, který z nich má antifungální účinek. Zdá se, že celkové sloučeniny mají antifungální účinek.
v makrodiluční metodě je smyčková kolonie čistá kultura C. albicans na Sabouraud dextróza agar za předpokladu, 0,5 McF pozastavení kandidóza koncentrace (103 a 106 houbových buněk na mL) v BHI (Brain Heart Infusion) agar vývar kultivační médium.
po přípravě poloviční Mcfarlandské suspenze bylo provedeno ředění C. albicans, levandule a klotrimazolu. Levandule s čistým rozpouštědlem DMSO (dimethylsulfoxid) byla tedy zředěna na 1/5 ve sterilní zkumavce a stejný postup byl proveden také pro klotrimazol. Potom se připraví ředění 1/10, 1/20, 1/40, 1/80 a 1/160 každého léčiva a nalije se do 5 jamek mikrodestičky. V šesté jamky mikrodestičky, DMSO kontrola byla nalita a, nakonec, 100 mikrolitrů půl-McFarland suspenze hub bylo přidáno do všech jamek mikrodestičky. Tento postup byl proveden třikrát pro levandule a třikrát pro klotrimazol (ve trojím vyhotovení) a konečně, mikrotitrační destičky byly umístěny v bain marie při 37°C. Po 24 a 48 hodin, houbové buňky byly počítány pomocí mikroskopu Neubauer hemocytometer (jako červených krvinek v hematologii). Kapka klotrimazolu (1%) byla vyrobena ve farmaceutické společnosti Behvazan a levandulový esenciální olej byl připraven ve společnosti Barij Essence. Získaná data byla analyzována pomocí deskriptivní statistiky a neparametrické analýzy Kruskal-Wallis test a Mann-Whitney a Wilcoxonův testy byly použity.
3. Zjištění
ze 45 vzorků podezřelých z vaginální kandidové infekce, žádný ze vzorků měl trichomoniázy v přímém testu, ale pouze 25 případů bylo pozitivních na C. albicans. V důsledku selhání 5 případů bylo in vitro testováno 20 případů C.albicans získaných od pacientů. Při analýze dat bylo testem normality zjištěno, že distribuce dat není normální. Byly tedy použity neparametrické testy Kruskal-Wallis a testy Mann-Whitney a Wilcoxon. Srovnání tří skupin levandule, klotrimazol, a DMSO ovládání pomocí Kruskal-Wallis test během prvních 24 hodin ředění 1/40 () a 1/160 () ukázala významný rozdíl mezi skupinami. Pokud jde o další ředění a po 48 hodinách, počet houbových buněk nevykazoval žádné významné rozdíly mezi těmito třemi skupinami. Srovnání dvou skupin levandule a klotrimazol pomocí Mann-Whitney test ukázal, že houbových buněk po 24 hodinách, v ředění 1/20 a 1/40 a 1/160, respektive, , , a měl významný rozdíl mezi oběma skupinami. V těchto ředěních byl během prvních 24 hodin počet buněk hub ve skupině levandule nižší než skupina klotrimazolu (Obrázek 1) a po 48 hodinách nebyl mezi skupinami zjištěn žádný rozdíl (Obrázek 2). Srovnání skupin klotrimazolu a DMSO však ukázalo, že mezi oběma skupinami existuje významný rozdíl v ředění 1/40 a 1/160 a mezi levandulí a DMSO není významný rozdíl. I když, jak je vidět na Obrázku 1, průměrný houbových buněk v levandule byla nižší než ostatní dvě skupiny ve většině ředění, testy neprokázaly žádné statisticky významné rozdíly.
Wilcoxonův test byl proveden zvlášť v klotrimazol a levandule skupiny porovnat změny mezi skupinami založen na stejném ředění mezi 24h a 48h. Srovnání klotrimazol skupiny po 24h a 48h ukázal, že existuje významný rozdíl mezi houbových buněk pro ředění 1/10, 1/20, 1/40, 1/80, a 1/160, respektive, , , ,,, a jeho průměr v dobu 48 hodin byla méně než 24 hodin. V levandule group, významný rozdíl byl pozorován mezi dvěma obdobími pouze pro ředění 1/20 a 1/80 . Také v této skupině byl průměrný počet houbových buněk také nižší po 48 hodinách. ale pro ředění 1/10 byl průměrný počet houbových buněk po 48 hodinách vyšší než více ředění. Některé léky jsou účinnější při nižších ředěních.
4. Diskuse
s nárůstem houbové léčby rezistentní na léky v posledních letech a nepříznivými účinky antifungálních látek se stala důležitá potřeba nových léků. V této studii bylo prokázáno, že levandulová bylina má antifungální aktivitu. Studie o antifungálních účincích levandule byly různé. Levandule měla v některých studiích velmi slabý inhibiční účinek houby, ale ve většině případů byl její antifungální účinek významně pozitivní . Devkatte et al. ve studii o rostlinných olejích jako potenciálních inhibitorech růstu Candida albicans bylo cílem stanovit minimální inhibiční koncentraci a minimální fungicidní koncentraci 38 esencí bylinného oleje. Uvedli, že skořicový olej byl nejlepší a měl dopad koncentrace fungicidů 0, 03 procenta proti 4 kmenům candida. Většina olejů byla umístěna ve střední skupině a 9 olejů bylo nejméně účinných, ve kterých byla levandule považována za nejméně účinnou skupinu . Mahboubi et al. uvádí se, že levandule má mírnou antifungální aktivitu, zatímco jiné éterické oleje, jako je tymián a pelargónie, mají silné antifungální účinky. Mahboubi ukázal, že některé esenciální oleje byly nejúčinnější proti kmenům candida . Levandulový olej má v zásadě dlouhou historii léčebného použití v tradiční čínské medicíně (TCM) a má antimikrobiální aktivitu proti houbám a bakteriím . Na této aktivitě se podílí několik kombinací, jako je linalylacetát, linalool, kyselina máselná a kyselina propionová . V podobné studii bylo prokázáno, že esenciální olej Lavandula angustifolia a jeho hlavní složky, linalool a linalylacetát, mohou zabíjet nebo inhibovat růst hub . Data ukázala významný rozdíl mezi třemi skupinami levandule, klotrimazolu a kontroly ve vyšších ředěních (1/40 a 1/160) pro antifungální aktivitu. Počet houbových buněk ve skupině levandule byl nižší než u ostatních skupin. Behmanesh et al. uvádí se, že počet houbových buněk v tubách obsahujících levandulovou infuzi a levandulovou esenci byl nižší než clotrimazolové zkumavky. Také nejúčinnější antifungální účinky léků (nižší počet houbových buněk) byly pozorovány při vyšších ředěních . Ve své studii, D ‚ Auria et al. bylo zjištěno, že vyšší ředění levandule inhibují tvorbu hub a prodloužení vláken a snižují růst hub a jejich rychlost difúze v tkáni.
výsledky srovnání dvou skupin levandule a klotrimazol ukázal, že houbových buněk po 24h, pro ředění 1/20 a 1/40 a 1/160, měl významné rozdíly. V těchto ředěních byl počet houbových buněk v levanduli nižší než klotrimazol. V podobné studii bylo prokázáno, že ve všech různých ředěních měl klotrimazol nejnižší antifungální účinky a nejvyšší počet houbových buněk. V této studii jsme zjistili, že nálev z levandule bylina a její podstata ve srovnání s klotrimazol má vyšší antifungální aktivitu proti C. albicans .
údaje o srovnání klotrimazolu a kontrolních skupin ukázaly významné rozdíly v koncentracích 1/40 a 1/160 mezi oběma skupinami. Gharibi et al. v jejich studii ve srovnání souběžné využití flukonazol a klotrimazol s častými dávka v léčbě recidivující kandidózy a ukázal, že dvě metody pro snížení stížností a příznaky svědění, škrábání, otok, zarudnutí a trhliny byly velmi účinné dva týdny po ošetření () a příznaky vaginální kandidóza také snížena v 6 týdnech léčby v intervenční skupině a měl významný rozdíl v kontrolní skupině ().
Výzkumné poznatky o změnách mezi skupinami podle stejného ředění, ale po 24h a 48h v klotrimazol skupina ukázala, že pro ředění 1/10, 1/20, 1/40, 1/80, a 1/160, tam byl významný rozdíl mezi oběma houbových buněk, v nichž jejich průměr byl vyšší než 24h 48h. Také, v levandule skupiny, na 1/20 a 1/80 ředění, významný rozdíl byl pozorován dvakrát a průměrné houbových buněk byla nižší po dobu 48 hodin. Ghahramanlo et al. provedl podobný průzkum a prokázal zvýšení antifungálních účinků akrylových pryskyřic se zvyšující se koncentrací nanočástic a časem ve srovnání s kontaktními mikroorganismy.
5. Závěr
Podle výsledků této studie a informace zaznamenané ve starých knihách o léčivé byliny z Íránu, můžeme získat další informace další výzkum na podporu účinnosti levandule.
střet zájmů
autoři žádný střet zájmů nemají.
poděkování
autoři děkují náměstkovi pro výzkum a technologii Babolské univerzity lékařských věd za finanční podporu.