Wykres biochemii strukturalnej/enzymu/podwójnej odwrotności: Wykres Lineweaver Burk

Wykres Lineweaver-Burke

równanie podwójnej odwrotności otrzymuje się przez wzięcie odwrotności z obu stron równania Michaelisa-Mentena. Wykres podwójnej odwrotności (znany również jako wykres Lineweavera-Burka) jest tworzony przez wykreślenie odwrotnej prędkości początkowej (1/V0) jako funkcji odwrotności stężenia substratu (1/). Vmax może być dokładnie określony, a tym samym KM może być również określony z dokładnością, ponieważ linia prosta jest utworzona. Nachylenie linii wynikowej wynosi KM / Vmax, punkt przecięcia osi y wynosi 1 / Vmax, a punkt przecięcia osi x -1 / KM. Korzystając z równania Michaelisa-Mentena, Vmax jest asymptotą, a zatem może być tylko przybliżony i w rezultacie KM, który jest Vmax / 2, nie może być dokładnie określony. Wykres ten jest użytecznym sposobem określenia różnych inhibitorów, takich jak konkurencyjne, niekonkurencyjne i niekonkurencyjne.

Inhibitor Kompetycyjny

w przypadku inhibitorów kompetycyjnych inhibitor konkuruje z cząsteczką substratu, aby związać się z miejscem wiązania. W związku z tym KM wzrośnie bez zmiany wartości Vmax. Oznacza to, że dwa wykresy będą miały taki sam punkt przecięcia osi y, jak pokazano poniżej. Jednak nowy x-intercept może być dość nieuchwytny. W przypadku tego typu inhibitorów potrzebne jest wyższe stężenie substratu, aby zająć połowę aktywnych miejsc. W związku z tym KM2 będzie większe niż KM1. Przekłada się to na wyższą wartość wzajemną KM1 niż wartość km2. Jednak punkt przecięcia x ma przed sobą znak ujemny, dlatego na wykresie musi przesunąć się w prawo względem poprzedniego punktu przecięcia. Aby pokazać to na wykresie podwójnego obrotu, nachylenie wzrośnie, aby pokazać siłę wiążącego inhibitora kompetycyjnego. Podczas gdy nachylenie wzrasta wraz z obecnością inhibitora, punkt przecięcia osi Y pozostaje taki sam w obecności i braku inhibitora.

w przypadku niekonkurencyjnych inhibitorów inhibitor wiąże się tylko z kompleksem enzymatyczno-substratowym; w związku z tym nie konkuruje z podłożem w miejscu wiązania. W konsekwencji zmniejszają się zarówno wartości KM, jak i Vmax. W konsekwencji wartość odwrotna nowej Vmax powinna znajdować się w wyższym położeniu na osi, ponieważ ułamek staje się większy, gdy mianownik staje się mniejszy. Nowa wzajemna wartość KM przesunie się w lewo, a Wyjaśnienie powinno być podobne do opisu inhibitora kompetycyjnego. Aby pokazać to na podwójnym wykresie wzajemnym, nachylenie pozostanie takie samo, jak gdyby enzym nie był związany z inhibitorem, ale punkt przecięcia osi x zmniejszy się. Podwójnie obustronny wykres dla enzymu z i bez niekonkurencyjnego inhibitora będzie dwiema równoległymi liniami.

w przypadku inhibitorów niekonkurencyjnych inhibitor może wiązać się z enzymem, zanim substrat może wiązać się z miejscem wiązania. Nie musi czekać, aż enzym stanie się kompleksem enzymatyczno-substratowym, aby związać się z enzymem. Hamowanie spowoduje zmniejszenie wartości Vmax, gdy KM Nie ulegnie zmianie. Oznacza to, że wartość -1 / KM pozostaje taka sama dla dwóch linii, podczas gdy nowa wartość 1/Vmax jest wyższa w stosunku do poprzedniej. Aby pokazać to na wykresie podwójnej odwrotności, zmniejszenie Vmax zwiększy punkt przecięcia osi y z większym nachyleniem.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany. Wymagane pola są oznaczone *