Taq polimeraza DNA, wyizolowana z Thermus aquaticus, jest termostabilną polimerazą DNA, która katalizuje zależne od startera wbudowywanie nukleotydów do dupleksowego DNA w kierunku 5’→3′ w obecności Mg2+. Jest to standardowa termostabilna polimeraza DNA stosowana w aplikacjach PCR. Taq nie wykazuje aktywności egzonukleazy 3 '→5′, ale wykazuje aktywność egzonukleazy 5 '→3′. Polimeraza Taq nadaje się do większości zastosowań PCR, które nie wymagają enzymu o wysokiej wierności, takiego jak wykrywanie określonych sekwencji DNA lub RNA.
typowa reakcja łańcuchowa polimerazy (PCR) obejmuje docelowy DNA, termostabilną polimerazę DNA, taką jak polimeraza Taq, dwa startery oligonukleotydowe, dNTPs, bufor reakcyjny i magnez. Po złożeniu reakcja jest umieszczana w cyklerze termicznym, który poddaje reakcję powtarzającym się cyklom zmian temperatury, podczas których DNA jest denaturowane, startery wyżarzają się do celu i są przedłużane przez polimerazę, aby utworzyć kopię nici DNA. Każdy cykl PCR teoretycznie podwaja ilość docelowej sekwencji w reakcji, dopóki składniki reakcji nie staną się ograniczające lub nie zostaną zużyte.
w końcowym PCR Analiza następuje po zakończeniu wszystkich cykli PCR i osiągnięciu plateau reakcji amplifikacji (lub punktu końcowego). Kontrastuje to z qPCR w czasie rzeczywistym, gdzie tworzenie produktu PCR jest monitorowane w czasie rzeczywistym, gdy zachodzi reakcja amplifikacji. Endpoint PCR jest metodą jakościową. Jest szeroko stosowany do wielu celów, w tym do określania obecności lub braku określonej sekwencji DNA w próbce docelowej, wykrywania patogenów, amplifikacji sekwencji docelowych do dalszej analizy i wykrywania określonych sekwencji DNA w celu identyfikacji osób lub typów komórek.
mieszanki wzorcowe PCR zawierają wszystkie składniki reakcji dla PCR, w tym polimerazę Taq, dNTPs i zoptymalizowany bufor. Master mixy upraszczają eksperymentalną konfigurację i oszczędzają czas, ponieważ użytkownik musi po prostu dodać szablon i startery do reakcji.