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그램 음성균(GNB)과 연결된 혈류 감염(BSI)결과에 중요한 사망률에서 특히 중환자실에 있는 환자(중환자). 가장 널리 퍼진 GNB 병원균 중에는 Escherichia coli,Klebsiella pneumoniae 및 Pseudomonas aeruginosa(4,8)가 있습니다. GNB 감염에 대한 경험적 치료법의 선택은 많은 P 중 고유 한 항균 저항성으로 인해 도전적입니다. k.pneumoniae 분리 물 중 카바 페넴 항균제에 대한 aeruginosa 균주 및 신흥 내성. 급속한 같은 날 병원균을 식별(ID)에서 직접 새로 긍정적인 피 문화를 병에 영향을 미칠 수 있는 적절한 선택의 경험적 치료에 있는 중요한 요인 환자의 결과를 개선(7)입니다. 펩티드 핵산 형광 in situ hybridization(PNA FISH)분석법(AdvanDx Inc.)는 자동화 된 표현형 ID 방법에 유리하게 비교되는 것으로 나타 났으며 약 90 분(10)의 결과를 산출 할 수있다. 현재 FDA 가 삭제 한 GNB PNA FISH assays(E)의 제한 사항. 대장균/P. 농 균 PNA 물고기와 대장균,K. 균/P. 농 균 PNA 물고기)을 수 없는 것입 차별화 대장균에서 K. 균. 이 multicenter 연구의 성능을 평가 GNR(G-부정적인 막대)교통 신호등 PNA 물고기(FDA 워에서의 시간이 연구),첫 번째 빠른 PNA 물고기 분석실험을 식별하는 3 개의 중요한 GNB(E.coli,K. 균 및 P. 농 균)에서 직접 새로 긍정적인 피 문화.
4 개의 미국 연구 사이트는 GNB 양성 임상 혈액 배양을 수집했습니다. 각 실험실의 표현형 ID 방법은 MicroScan(Siemens Healthcare Diagnostics,TARRYTOWN,NY)또는 VITEK2(bioMérieux,Inc.)를 사용하여 수행되었습니다.,더럼,노스 캐롤라이나). 이 연구를 위해 수집 된 데이터에는 환자 식별자가 없었으며 임상 목적으로 그려진 혈액 배양 물만 사용되었습니다. 기관 검토위원회(irb)승인 또는 면제는 각 기관에서 연구 프로토콜에 대해 획득되었다. 각 사이트는 다음 세 가지 자동화 된 지속적으로 모니터링되는 혈액 배양 시스템 중 하나를 사용했습니다:BacT/Alert(bioMérieux,Inc.,Durham,NC),BACTEC(BD Diagnostics,Spark,MD),또는 VersaTrek(Trek Diagnostic Systems,Cleveland,OH). 각 샘플에 대해 gnr 신호등 PNA FISH 를 제조업체의 지침에 따라 수행했습니다. 슬라이드를 형광 현미경 검사(60×또는 100×oil objective,듀얼 밴드 패스 fluorescein isothiocyanate/Texas Red filter)로 검사했습니다. 결과는 긍정적으로 해석할 때 형광등 세포 볼 수 있었 여러 분야에서의 보고,다음과 같이 녹색에 대한 대장균 빨간 P. 농 균 및 노란색에 대한 K. 균. 또한,EK/P. aeruginosa PNA FISH 는 각 샘플에서 수행되었습니다(데이터는 표시되지 않음). Gnr 신호등 PNA FISH 는 과량의 혈액 배양 물질에 대한 일상적인 실험실 ID 와 동시에 수행되었습니다. 각 연구 현장에서 PNA FISH 테스트의 운영자는 모든 테스트가 완료 될 때까지 일상적인 실험실 ID 의 결과에 눈이 멀었습니다.
의 총 490 임상 혈 문화에 대한 긍정적 GNB 여 그람 염색,그리고 4 혈 문화 병 spiked 임상 P. 농 균 격리 연구에 포함 되었. 자동화 된 표현형 ID 방법은 2 개 이상의 유기체의 혼합 성장 배양에서 43 개를 포함하여 537 개의 분리 물을 확인했다. 확인 된 유기체 중 186 개(34.6%)는 대장균,110 개(20.5%)는 K.pneumoniae,48 개(8.9%)는 P.aeruginosa 였다. 43 개의 혼합 배양 물 중 15 개는 GNR 신호등 PNA 물고기 표적 유기체 중 2 개가 존재하는 것으로 확인되었으며 따라서 2 개의 형광 결과를 나타낼 것으로 예상되었다. GNR 신호등 PNA FISH 는 대장균 분리 물의 100%(186/186),K.pneumoniae 분리 물의 99.1%(109/110),P 의 95.8%(46/48)를 정확하게 확인했습니다. 아에 루기 노사 분리 물(표 1). 중 하나 거짓에 대한 부정적인 K. 균 및 두 개의 틀린 네거티브 위한 P. 농 균 모두에 혼합 문화,기록되었(분리할 수 없었다 다시 테스트). 에 따르면 제조업체의 라벨을 다른 PNA 물고기 분석실험과 같은 대장균/P. 농 균 PNA 물고기,limit detection(LOD)105CFU. 혼합 문화,그것은 하나의 유기체 있는 성장은 다른과는 병도 신호에 긍정적 자동화된 혈액화 장치기 전에 모두 유기체 이 LOD 에 대한 PNA 물고기를 분석하지 않아도 됩니다. 시험의 특이성은 98 이었다.2% (162/165). 혼합된 문화에 포함된 하나 이상의 분리 다른 것보다 대장균,P. 농 균거나,K. 균(28 에 모두)를 계산하면서 특이성 계산기 때문에만 하나의 부정적인 결과를 기대할 수 있을 관찰할 수 있는 시간입니다. 하나의 엔테로박터 으 샘플 준양성 대장균(녹색)결과(부정적인에 따라 반복 테스트),그리고 하나 Acinetobacter baumannii 샘플 준 긍정 P. 농 균(red)결과(분리/견본을 사용할 수 없을 위한 추가적인 테스트). 또 다른 거짓 긍정적 인 피. aeruginosa(적색)결과는 드문 임상 분리 물인 Acinetobacter radioresistens 를 함유 한 샘플로 발생했습니다. 의 분석을 공개적으로 사용 가능한 시퀀스(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)밝혔 부분을 보완 시퀀스에 대한 유사성이 A.radioresistens 로 P. 농 균 PNA 프로브.
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성능 특성의 GNR 등 PNA 물고기 assayg
부적절한 항생제를 초기 선택과 지연을 시작에 효과 항균성 치료는 표시 되었습니다 불리하게 영향을 가진 환자에 있는 사망률 GNB BSI(6,7,9)그리고,녹 BSI,와 관련되어 더 이상의 길이가 병원 입원(9)입니다. 대장균,P.aeruginosa 또는 K 의 신속한 식별 균 혈액에서 문화를 병은 잠재적인 영향을 미칠 임상 결정을 내릴 수 있도록 초기 선택의 대상으로 효과적인 항균성 치료하고,따라서,더 나은 참을성 있는 결과 및 감소된 길이의 병원합니다. 한번 종이 식별되는 치료 요법 antipseudomonal 활동 등 토 브라 마이신 또는 피페라진-tazobactam 선택할 수 있습에 대한 P. 농 균 감염 및 ceftriaxone 또는 다른 적절한 약물에 대한 대장균 bacteremia. K 의 조기 식별. 균 혈액에서 문화를 사용한 급속한의 개시 적절한 치료에 기반 저항 패턴의 유기체에 주어진 기관과 같은 평가의 확장 스펙트럼 β-락타 마(ESBL)운송 또는 보급의 carbapenem 저항입니다. 급속한 PNA 물고기 결과에 대한 부정적인 대장균,P. 농 균거나,K. 균되었음을 나타내는 증가로서의 가능성을 분리되는 저항하는 세팔로스포린,추가 지원하의 개념을 빠른 병원균 ID 영향을 미치는 치료적 의사 결정(5).
이 연구는 GNR 등 PNA 물고기는 매우 민감하고 특정 분석실험을 식별하기 위한 가장 일반적인 GNB 복구에서는 새로 긍정적인 피 문화의 병입니다. 시간을 결과에 대한 GNR 등 PNA 물고기에서 긍정적인 피 문화는 약 90min(손에 기술자 시간은 약 10 분 테스트),에 비해 1~3 일에 대한 기존의 표현형 방법이 있습니다. 를 평가하고 있는 동안은 실제적인 비용 GNR 등 PNA 물고기를 구현의 범위를 넘어 이 연구는 대략적인 비용에 따 테스트 기반의 제조업체의 표시 가격은$39 포함하지 않는(컨트롤),메디케어의 상환$84.66. 에 의해 제안의 연구는 기타 PNA 물고기를 분석,실험실에 대한 비용의 구현 GNR 등 PNA 물고기의 것 정당한 때에 측정되는에 대해 향상된 환자의 결과를,감소의 길이가 병원 입원,그리고 현명한 사용의 항균성 치료(1,2,3). 의 직접적인 효과를 GNR 등 PNA 물고기의 선택에 적절한 치료 경험적,이후 환자의 결과,그리고 비용 이득이 될 지역의 관심이 미래에 대한 연구이다.