過分極誘導AD促進
我々は、まずシナプス伝達におけるシナプス前細胞の短時間の過分極の発生率を測定した。 単シナプス的に接続されたCA3ニューロンのペアは、in vitro（DIV）21で8-10日後にラット海馬の有機型培養で記録されました。 シナプス前スパイクの前に送達された200msの過分極前パルスは、シナプス強度を≧20％増加させることが見出された（図10B）。 1a）。 この増加は、シナプス後応答の振幅または電荷のいずれかを測定したときに観察された（補足図４）。 1). これらの実験では、シナプス前安静電位は-74±3mV（n=10）であった。 シナプス前過分極が−８ ４または−１ ０ ２ｍＶに達したとき、ｈ−ＡＤＦは同等であった（それぞれ、１ ２ ４±８％対１ １ ９±５％、ｎ＝１ ０；Ｗｉｌｃｏｘｏｎ ｔｅｓｔ Ｐ＜ｄｉｖ ｉｄ＝“ｃｃ３ ３ ２ ２ ５ｄ４ ２”＞＜／ｄｉｖ＞０）。1)、≥10mVのシナプス前過分極が飽和h-ADFを得るのに十分であることを示唆しています。 ｈ−ＡＤＦは、減少した対パルス比（ＰＰＲ、９ ９±７から８ ８±５％、ｎ＝１ ２；Ｗｉｌｃｏｘｏｎ ｔｅｓｔ Ｐ＜ｄｉｖ ｉｄ＝“７ １ ０ ８ａ８ ３ ０ ５ ７”＞＜／ｄｉｖ＞０． 1)、グルタミン酸放出のシナプス前増加に起因することを示す。
（a）過分極プレパルス（200ミリ秒の持続時間）によるCA3–CA3接続でのシナプス伝達の促進。 左、記録構成の概略図。 中間、シナプス前過分極パルスによって生成された促進の例（10トレースを平均した）。 右、振幅の増加のシナプス前過分極によって誘導される促進の要約。 過分極前パルスの大きさが増加したときには、それ以上の促進は誘導されなかったことに注意してください。 （ｂ）ｈ−ＡＤＦは、短時間のシナプス前過分極によって誘導され得る。 左、スパイクの前に-93mVへの過分極のない過分極と15、50、100および200ミリ秒と接続されたCA3錐体ニューロンのペアから記録の例。 右、15、50、100および200msによって誘導される促進の要約（すべてのWilcoxon検定、P<0.05、n=7）。 （ｃ）Ｄ−およびｈ−ＡＤＦは、ＣＡ３−ＣＡ３接続で共発現される。 左、代表例。 トップトレース、コントロールにおけるシナプス前ニューロンの膜電位（黒）、d-ADF中（赤）、h-ADF中（青）、およびd-およびh-ADFが組み合わされたとき（暗赤色）。 ボトムトレース、シナプス後の応答は、それぞれの場合に10回の試行にわたって平均しました。 右、グループデータ（Mann-Whitney検定、n=16、d-ADFの場合、11、h-ADFの場合、および16d-およびh-ADFの場合）。 D-ADFとh-ADFが組み合わされた場合の伝送の段階的な増加に注意してください。
200ミリ秒の長さの過分極は、生理学的な文脈では起こりそうにありません。 したがって、我々は短い過分極（15、50、100および200ミリ秒）のためのh-ADFの時間経過を調べた。 ｈ−ＡＤＦは、試験した過分極の全持続時間について観察された（１ ５ｍ ｓ：１ １ １±３％、５ ０ｍ ｓ：１ １ ６±４％、１ ０ ０ｍ ｓ：１ ０ ９±４％、２ ０ ０ｍ ｓ：１ ２ ０±６％Ｗｉｌｃｏｘｏｎ，Ｐ＜ｄｉｖ ｉｄ＝“７ １ ０ ８ａ８ ３ ０ ５ ７”＞＜／ｄｉｖ＞０． 1b）。 この結果によれば，ｈ-ＡＤＦは生理的過分極によって誘導される可能性が高い。
CA3錐体ニューロンは、Kv1.1チャネル（時定数：3.3秒）の遅い不活性化に起因する脱分極誘導AD促進（d-ADF）を発現する13。 我々は、このようにd-とh-ADFの両方が同じCA3–CA3接続で発現したかどうかを調べた。 シナプス前Ａｐは、休止膜電位（−７ ８ｍＶ対照）、長い閾値以下の脱分極（１ ０秒、−６ ２．６ｍＶ、ｄ−ＡＤＦ）後、短い過分極（２ ０ ０ｍｓ、−９ ６．１ｍＶ、ｈ−ＡＤＦ）後、または長い脱分極と短い過分極（ｄ−およびｈ−ＡＤＦ； 1c、左）。 実際には、ＡＤＦの２つの形態の組み合わせは、同じ接続において、より大きな促進を生じた（１ １ ３±３％、ｎ＝１ ６；図１ ４Ａ）。 （Ｄ−ＡＤＦ単独：１ ０ ５±３％、ｎ＝１ ６、ｈ−ＡＤＦ単独：１ ０ ８±４％、ｎ＝１ １；図１Ｃ）各プロトコルによって別々に生成されたものよりも（ｄ−ＡＤＦ単独：１ ０ ５±３％、ｎ＝１ ６、ｈ−ＡＤＦ単独：１ ０ ８±４％、ｎ＝１ １；図１Ｃ）。 1c）。 特に，平均したｈ-およびｄ-ＡＤＦは直線的に合計され，二つの独立した分子機構を示唆した。 さらに、同じ対で測定されたd-およびh-ADFは正の相関を示した（補足図。 1)、軸索に沿ってアナログ信号の伝播は、相馬とシナプス前端子間の距離に依存するため、いくつかのシナプス接続は、おそらく、AD促進の影響を受けやすい これらのデータは、H-とd-ADFがCA3錐体ニューロンに共存し、基礎となるメカニズムが独立している可能性が高いことを示しています。
h-ADFは若いCA3ニューロン（DIV8–10P5–P7ラットから調製）で観察されたため、主に電圧ゲートイオンチャネルの低密度または未熟な特性に起因する可 したがって、h-ADFはまた、成熟したCA3錐体細胞で発見されたかどうかを決定しました。 接続されたCA3ニューロンのペアの記録は、DIV24–DIV32スライス培養で得られた。 簡単なシナプス前過分極（200ミリ秒）が大幅にシナプス強度を増加させた（104。2±1.1%n=25;Wilcoxon,P<0.01;補足図。 2). 成熟細胞で測定されたｈ−ＡＤＦは、発達中のニューロンで測定されたものより小さかった（Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ，Ｐ＜ｄｉｖ ｉｄ＝“７ １ ０ ８ａ８ ３ ０ ５ ７”＞＜／ｄｉｖ＞０． 2). したがって、h-ADFは、IN vitroでCA3ニューロンで発達的に調節されていると結論づけている。
すべての記録は、シナプス強度を最適化するために、高い細胞外カルシウム（3mM）で得られた。 これらの条件下では，シナプス前放出確率が高く，ｈ-ＡＤＦのようなシナプス前促進が過小評価される可能性がある。 したがって、成熟したCA3ニューロン（DIV24-DIV32）生理学的細胞外カルシウム（1.3mM）22で記録されたh–ADFを測定しました。 これらの条件下では、ｈ−ＡＤＦは約＋１ ６． 2). Ｈ-ＡＤＦは，生理的細胞外カルシウム中に記録された成熟ニューロンで頑健に発現していると結論した。
h-ADFは、シミュレートされたIPSPsと振動によって誘導されます
h-ADFの役割を調べるために、ダイナミッククランプを用いてシナプス前ニューロンにGABAA様のコンダクタンスを導入しました（図。 2a、左）。 図に示す結果と一致する。 図１では、ＩＰＳＣ様電流の注入に先行するＡｐは、休止膜電位から誘発されるＡｐと比較して、シナプス後ニューロンにおいてより大きな応答を生成した（Ｗｉｌｃｏｘｏｎ Ｐ＜ｄｉｖ ｉ ｄ＝” グルタミン酸放出のシナプス前上昇と一致して、シミュレートされたＧａｂａ作動性ＩｐｓｐがＡｐに先行したとき、ＰＰＲは減少した（対照では１ ２ １％から９ ６％；Ｗｉｌｃｏｘｏｎ Ｐ＜ｄｉｖ ｉｄ＝“７ １ ０ ８ａ８ ３ ０ ５ ７”＞＜／ｄｉｖ＞０． 興味深いことに、シナプス増強のサイズは、シミュレートされたIPSPのサイズ（R2=0.39、P<0.05）に依存することが判明し、h-ADFが休止膜電位（-74mV）と10mV過分極（-84mV;図 2a、右）。 実際には、この範囲の促進因子は、過分極のmVあたり1.8％であることが判明しました。図2：h-ADFの生理学的誘導。
(a)シナプス前Ｉｐｓｐは、ｈ−ＡＤＦを誘導する。 左、シナプス前ニューロンにおけるGaba作動性入力を模倣する動的電流を注入するために使用されるシステムの模式図。 中間、制御条件でCA3ニューロンの接続されたペアからの電気生理学的記録の例（黒のトレース）とシミュレートされたGaba作動入力がシナプス前細胞（青のトレース） 右は、シミュレートされたシナプス前ＩＰＳＰのピーク値の関数として正規化ＥＰＳＰ／Ｃを示す散布図である。 明確な線形相関が観察された（y=-1.8x+101.8、PearsonのR2=0.39、P<0.05、n=11）。 (b)H-ADF CA3ニューロンのしきい値下σ振動中に誘導されます。 左、代表例。 シナプス前スパイクは、4Hzでの膜電位のしきい値以下の振動の間に異なる相でトリガされます。 振動の過分極相の間にスパイクがトリガされると、促進が観察されることに注意してください。 右、定量的データ（n=8）。 星：有意な変化（Wilcoxon、P<0.05）。
我々は、次のシナプス前膜電位振動中のシナプス強度の変調を調べました。 4Hzでのシナプス前膜電位の振動は、正弦波電流を注入することによって生成され、単一のシナプス前スパイクは、振動の異なる位相で誘発された。 以前の結果と一致して、振動の過分極相の間に細胞が焼成されたときにh-ADFが観察された（0ms：124.3±7％、250ms：122±7％、Wilcoxon P<0.05、n=8;図 2b）。 他の段階では、シナプス強度は変化しない（56ms：112.2±6％、163ms：95.8±5％、211ms：110.5±6％、Wilcoxon P>0.1、n=8）。 特に、D-ADFはKv1.1チャネルを不活性化するにはその持続時間が短すぎるため、脱分極では観察されない13。 我々は、π範囲の振動がca3ニューロンにおけるh-ADFを誘導すると結論付けている。
h-ADFは軸索スパイク振幅の増加に関連付けられています
次に、h-ADFの基礎となるメカニズムを調べました。 Ｈ-ＡＤＦの可能な機構は，過分極によって誘導されるシナプス前スパイク振幅の変調である。 そこで，軸索で測定したスパイク振幅に対する過分極の結果を調べた。 CA3ニューロンにAlexa488(50μ m)を充填して軸索の樹状突起を可視化し、60〜240μ mの範囲の距離で軸索から細胞付着記録を得た(図10B)。 3a）。 体細胞過分極では、軸索スパイクの振幅が増強された（対照振幅の106±1％、n=6、Wilcoxon、P<0.05;図12A;図12B;図12C;図12C;図12C;図12C;図12C;図12C;図12C;図12C;図12C;図12C;図12C;図12C; 3b）。 しかし、軸索スパイク促進の大きさは、212μ mの空間定数を有する軸索距離とともに減少することが見出された（図。 3b）。 結論として、CA3ニューロンのh-ADFは、軸索のスパイク振幅の局所的な増加に関連付けられています。
(A)左、Alexa488で満たされたCA3ニューロンの共焦点画像。 軸索側副（白い矢印）は、左側に識別され、セル添付の構成で記録される。 右、スパイクが静止膜電位（黒）または一時的な過分極前パルス（青）からトリガされたときに、相馬（上）と軸索（下）からの同時記録。 （ｂ）左、（青）または（黒）過分極前パルスなしで誘発された軸索で測定されたスパイク振幅の比較。 スパイクがhyperpolarizing前脈拍から誘発されるとき軸索の広さの増加に注意して下さい。 六つのニューロンにおける軸索スパイク振幅の過分極誘発性増強の中間、定量的分析。 右、軸索距離の関数としての軸索スパイク振幅の変化の散布図（指数近似、y=11.6e−x/212、r2=0.81）。CA3軸索からの全細胞記録は、有機型培養では非常に困難であるが、それは急性slices5、6からL5錐体ニューロンで得ることができます。 したがって、我々は最初にh-ADFもL5–L5興奮性接続で観察することができるかどうかを測定しました。 単シナプス的に接続されたL5錐体ニューロンのペアは、若いラット（P14-P20）の感覚運動皮質から急性スライスに記録された。 シナプス前ニューロンの相馬（200ms、10-15mV）における簡単な過分極は、シナプス強度を増強することが見出された（109.6±2.3％、n=13、Wilcoxon test、P<0.05;図 4a）。
(a)シナプス的に接続されたL5錐体ニューロンのペア記録。 中間、シナプス促進は、短いシナプス前過分極（-20mV;200ミリ秒）によって生成されます。 Epscは、25トレース以上の平均値に対応します。 右、12L5-L5対で得られたh–ADF。 (b)L5錐体ニューロンにおけるデュアル相馬軸索記録。 左、l5錐体ニューロンの相馬と軸索blebからの二重記録を示す実験デザイン。 L5錐体ニューロンにおける中間、相馬軸索記録。 相馬の短い過分極は軸索のスパイクの振幅を増強するが、相馬のスパイクの振幅を増強しないことに注意してください。 右上、静止（黒）または過分極（青）電位（それぞれの場合についてn=6トレース）について、細胞体内の膜電位の関数として軸索で測定されたAPオーバーシュート。 右下、安静時（黒）と短い過分極（青）に続いて誘発された軸索スパイクの位相プロット。 短い過分極（矢印）の後に強化された振幅に注意してください。 脱分極率も向上し，スパイクしきい値はわずかに過分極した。
L5錐体ニューロンにおけるh-ADFが軸索スパイク振幅の増加に関連していることを確認するために、l5錐体ニューロン 相馬の一時的な過分極（約-13mV）は、軸索におけるスパイクのオーバーシュートの振幅を強化したが、相馬では強化しなかった（+5.5±1.5対–0.3±1.1mV、n=5、Mann-Whitney、P<0.05;図。 4b）。 脱分極の速度も増加し（251±59から289±56mV ms−1、n=5）、スパイクしきい値は過分極した（-35.7±5.2から-38.8±4.3mV、n=5）。 我々は、CA3とL5錐体細胞の両方におけるh-ADFは、軸索で測定されたスパイク振幅の増加に関連付けられていると結論付けている。
h-ADFは、強化された軸索カルシウム信号に関連付けられています
我々は、次の軸索のスパイク振幅の過分極誘発増強の結果を決定するためにCa2+ CA3錐体ニューロンは50μ m Alexa-594で満たされ、250μ m Fluo-4およびスパイク誘発カルシウム信号は、相馬から150と250μ mの間の距離で推定en passant boutonsで測定された（図。 5a）。 スパイク誘発Ca2+過渡の積分は、シナプス前スパイクが≥20mV（126±10％、n=5の過渡過分極後に誘発されたときに増加した。 5b）。 我々は、h-ADFの間に、シナプス前過分極は、シナプス前スパイク振幅とその後グルタミン酸放出を強化するスパイク誘発Ca2+流入の両方を強化する、と結
(a)簡単な過分極プレパルスは、スパイク誘発Ca2+過渡を強化します。 左上、Alexa-594とFluo-4で満たされたCA3錐体ニューロンを示す実験デザイン。 ホワイトボックス: 右に拡大した領域はシナプス前のブートンを示している。 右上、CA3錐体ニューロンの細胞体に記録された電圧トレース。 右下、シナプス前ブートンに記録された蛍光信号の例。 スパイク誘発Ca2+過渡は、シナプス前スパイクが一時的な過分極後に誘発されたときに≥20％増加した。 （ｂ）定量データ（ｎ＝５）。
軸索におけるNavチャネルの不活性化は、h-ADFを決定します
過分極中の軸索スパイクの振幅の増加は、不活性化からNavチャネ H-ADFにおけるナトリウムチャネル不活性化の役割を確認するために、我々は二つの単シナプス接続CA3ニューロンのニューロンモデルを使用しました。 次に，ｈ-ＡＤＦ上の軸索におけるナトリウムチャネルの不活性化を修飾する発生率を決定した。 軸索ナトリウムチャネルの半不活性化を-80mVに設定したとき（refs18、19）、体細胞過分極は、スパイク振幅、スパイク誘発カルシウム電流とシナプス伝達の電荷 6a、左）。 これは、過分極による不活性化からのＮａｖチャネルの回復によるものである（図１ ０Ａ）。 6b、左）。 しかし、軸索ナトリウムチャネルの半不活性化を−７ ０ｍＶに設定した場合、変化は生じなかった（図１ ４）。 6a、右）。 この後者の場合、利用可能なＮａｖチャネルの割合は、静止膜電位において既に非常に高く、完全な振幅のＡＰを生成する（図１ ０Ａ）。 6a、b、右）。 したがって、不活性化からの回復は、シナプス前スパイク振幅にさらに影響を与えない。 したがって、モデル中のｈ−ＡＤＦは、不活性化からのＮａｖチャネルの回復に起因し、Ｎａｖ半不活性化を過分極することによって増加される（図１ ０Ａ）。 6c）。図6：h-ADFにおけるNav不活性化の役割。
(a)コントロール条件でシミュレートされたh-ADF(軸索ナトリウムチャネルのV1/2不活性化=-80mV)。 スパイクの振幅の増加に注意してください。 軸索ナトリウムチャネルの半不活性化が脱分極されたときのh-ADFの欠如（V1/2=-70mV）。 （ｂ）Ｖ１／２不活性化＝−８ ０ｍＶまたは−７ ０ｍＶでのＮａｖａｘｏｎの利用可能性の概要。 -80mVではなく-70mVで顕著な増加に注意してください。 （ｃ）軸索におけるＮａｖチャネルのＶ１／２不活性化の関数としてのシミュレートされたｈ−ＡＤＦの大きさ。 V1/2の過分極によって誘導されるh-ADFの増加に注意してください。 （ｄ）ＣＢＺによるＮａｖ不活性化の実験的増強は、ｈ−ＡＤＦの大きさを増加させる。 制御条件下（左）では、この接続はh-ADFを表しません。 CBZが追加されると、h-ADFが表示されます（右）。 （ｅ）１ ０個の成熟Ｃ Ａ３−Ｃ Ａ３接続の定量的データ（ＤＩＶ２ ４−３ ２）。 星:Wilcoxon,P<0.05.さらに、我々は、図3で使用されたものと同様に、シータ振動中の軸索Navチャネルの利用可能性をシミュレートするために我々のニューロンモデルを使用した。 2b. Ｎａｖチャネルは、脱分極の間に不活性化し、過分極の間に回復することが見出され、振動の間のＥＰＳＣ変調を説明した（補足図１）。 4). しかし、不活性化は、脱分極電位でのNav速度論が遅いため、振動中の回復よりも速い（補足図。 4). これは、スパイクがわずかに過分極した電位から放出されるが、163msで生成されたEpscがh-ADFを提示しなかった理由を説明する（図10A）。 2b）。 実際、振動のこの時点で、Ｎａｖチャネルは、不活性化から回復するのに十分な時間を有していなかった（補足的な図１ ０Ａ）。 4).完全に、これらの結果は、h-ADFが不活性化からのNavチャネルの回復によるものであるという事実を支持する。
Navチャネル密度は、h-ADFの強度を決定します
h-ADFは、軸索におけるナトリウムチャネルの利用可能性に依存します。 したがって、Ｎａｖチャネルの密度を減少させることは、ｈ−ＡＤＦに影響を与えるはずである。 実際、本発明者らのモデルは、Ｎａｖチャネル密度を対照条件の７ ０％に減少させることにより、ｈ−ＡＤＦが１ ３ ０から１ ８ ０％に増強されることを示した（図１ ０Ａ）。 7a）。 ここでの重要なパラメータは、活性化可能なNaコンダクタンスに依存するシナプス前スパイクオーバーシュートのゲインでした（図。 7b）。 制御条件下では、この値はすでに高く、-78から-93mVにシナプス前要素を過分極すると、28％スパイクの振幅が強化されました。 Navの密度が減少したとき、同じ過分極は42％シナプス前APの振幅を強化した。
我々は、次のNAVチャネル密度を減少させることがCA3ニューロンのh-ADFを増加させることを実験的に検証しました。 したがって、我々は部分的に浴（15-25nM）に適用されるテトロドトキシン（TTX）の低濃度でNavチャネルをブロックしました。 この濃度では、TTXはNa+電流の80%以上を遮断しますが、高速Na+スパイクの誘導を維持します24,25。 ＴＴＸの存在下では、相馬におけるスパイク振幅は４ ５±４％減少し（ｎ＝９）、ＣＡ３−ＣＡ３接続におけるシナプス伝達は５ ５±８％減少した（Ｎ＝９；補足図１）。 5). 最も重要なことは、１ ５〜２ ５ｎＭのＴＴＸを有する活性化可能なＮａｖチャネルの割合を減少させることは、ｈ−ＡＤＦを発現しない成熟ニューロンにおいてｈ−ＡＤＦを大幅に増強す 7c、d）。 したがって、これらのデータは、CA3ニューロンにおけるh-ADFがNavチャネルの利用可能性に依存することを確認する。
t型Ca2+チャネルは軸索に存在する。 それらは、ｈ−ＡＤＦを誘導するために使用される過分極−脱分極配列の間に活性化される可能性があり、したがって、ｈ−ＡＤＦを説明する可能性がある。 しかし、h-ADFは、100nMのmibefradil、T型チャネルブロッカーの存在下で安定したままであることが判明した（対照では112.2±1.1％からmibefradilでは116.2±11.9％まで、n=3;データは示されていない）、T型Ca2+チャネルがh-ADFに関与していないことを示唆している。
h-ADFがネットワーク同期を促進する
次に、80個の錐体様興奮細胞（e細胞）と20個の介在ニューロン様抑制細胞（i細胞）が相互接続して形成された海馬ネットワークモデルを用いて、ネットワーク同期におけるh-ADFの含意を試験した（図1）。 Ｍｅｔｈｏｄｓを参照されたい）。 ｅ細胞およびｉ細胞は確率的入力によって供給された。 E細胞のネットワークは同期し、e細胞間のシナプス強度が増加するにつれてガンマ範囲の振動が現れた（補足図。 6). これらの振動は、ｉ−細胞によって駆動された：ｅ−細胞の活性化は、ｉ−細胞の活性化を促進することが見出され、これは、今度は、ネットワーク全体を沈黙させ 6). シナプス前スパイクがIPSPによって先行されているときh-ADFは錐体間シナプス強度を増加させるので、h-ADFは、これらのi細胞駆動振動を促進するため
(A)CA3ネットワークモデルのスキーム。 ネットワークは、80個のeセル（白い三角形）と20個のiセル（赤い円）で構成されています。 錐体細胞と介在ニューロンは確率的入力によって供給された。 錐体ニューロン間の接続（青い矢印）は、h-ADFが他の接続で実験的にテストされていないため、h-ADFを追加できる唯一の接続です。 (b)錐体ニューロン間の興奮性シナプスにおけるh-ADFルール。 スパイクの17ms前に測定された膜電圧に応じて、最大20％の促進が適用されます。 (c)h-ADFルールがネットワーク同期に及ぼす影響。 左上、2.8ミリ秒のシナプス強度を持つ制御条件でのネットワーク活性を示すラスターグラム。左下、e細胞の代表的なトレース。 右上、h-ADFルール（+20％h-ADF）では、同期が増加します。 右下、eセルの代表的な痕跡。 膜電位はスパイク（点線）の間に−73-mVの限界を横切ることに注意してください。 (d)cで示すデータのパワースペクトル(シナプス強度2.8mS)。 H-ADFルールを追加すると、ガンマ周波数（29Hz）の周りのネットワーク同期が劇的に増加します。 (e)2から3.6までのシナプス強度について計算された同期係数。 H-ADFの取り込みはsynchronyを増加させる（青）。
h-ADFルールは、スパイクの17ms前に測定された膜電位に応じてe細胞間のシナプス強度を増加させることによっ 実際、シナプス前電位が−８ ４ｍＶ以下であった場合、シナプス強度は２ ０％増加した（図１ ０Ａ）。 8b）。 この規則は、実験的に測定された値から直接導出された（図1aおよび2a参照）。 2.8mSのe細胞シナプス強度のために、ネットワーク内のh-ADFを追加することは著しくe細胞全体で発射周波数と同期の両方を強化した（図。 8c-e）。 実際、ｅ細胞間のｈ−ＡＤＦが有効であれば、ガンマ範囲内で振動する傾向が非常に促進された（図１ ０Ａ）。 8e）。 興味深いことに、シャント阻害を伴うネットワーク（対照条件では-80mVの代わりにECl=-73mV）では、h-ADF規則は同期を改善せず、ガンマ振動を促進しなかった（補 6). しかし，ｈ-ＡＤＦはｅ細胞間のシナプス強度を増加させるので，その同期効果は単にネットワークのスパイク率の増加によるものである可能性がある。 シナプス強度に影響を与えることなくスパイク速度を増加させるために、我々は2.5mSでe細胞間の強度を固定し、6から20Hzにe細胞の外部駆動周波数 同期係数とネットワークのスパイク率をプロットしました。 同期がスパイクレートに線形相関していることが示されたとしても、h-ADFは4-14-Hzの範囲で任意のスパイクレートの同期係数を増加させた（補足図。 6). これは、低スパイク率のために、h-ADFは独立して平均ネットワーク活動の同期を増加させることを示した。 結論として，我々のモデルでは，ｈ-ＡＤＦはネットワーク同期を増加させ，介在ニューロンの活性と錐体間シナプス強度をリンクすることによって振動を促進する。