Szerkezeti Biokémia/Enzim/Dupla-Kölcsönös telek: Lineweaver Burk plote

Lineweaver-Burke telek

A kettős kölcsönös egyenlet nyert azáltal, hogy a kölcsönös mindkét oldalán a Michaelis-Menten egyenlet. A kettős-kölcsönös (más néven a Lineweaver-Burk) parcellát az inverz kezdeti sebesség (1/V0) ábrázolásával hozzák létre a szubsztrátkoncentráció inverzének függvényében (1/). A VMAX pontosan meghatározható, így a KM pontosan meghatározható, mivel egyenes vonal alakul ki. A kapott vonal lejtése KM/Vmax, az y-intercept 1 / Vmax, az x-intercept pedig -1/KM. A Michaelis-Menten-egyenlet segítségével a Vmax egy aszimptot, így csak közelíthető, így a KM-t, ami Vmax/2, nem lehet pontosan meghatározni. Ez a telek egy hasznos módja annak, hogy meghatározzák a különböző inhibitorok, mint a versenyképes, versenyképtelen, nem versenyképes.

Kompetitív Inhibitor

A versenyképes gátlók, a gátló versenyez a hordozó molekula kötődik a kötőhely. Következésképpen a KM a Vmax érték megváltoztatása nélkül növekszik. Ez azt jelenti, hogy a két gráfnak ugyanaz az y-interceptje lesz, mint az alábbiakban látható. Az új x-intercept azonban meglehetősen megfoghatatlan lehet. Az ilyen típusú inhibitorok esetében a szubsztrát nagyobb koncentrációja szükséges az aktív helyek felének elfoglalásához. Ezért a KM2 nagyobb lesz, mint a KM1. Ez a Km1 magasabb kölcsönös értékét jelenti, mint a KM2. Az x-Interceptnek azonban előtte van a negatív jele, így a grafikonon jobbra kell mozdulnia az előző elfogáshoz képest. Ennek a kettős kölcsönös telken történő bemutatásához a lejtő növekedni fog, hogy megmutassa a kötelező verseny inhibitor erejét. Míg a lejtés az inhibitor jelenlétével növekszik, az y-intercept ugyanaz marad az inhibitor jelenlétében és hiányában.

versenyképtelen inhibitorok esetén az inhibitor csak egy enzim-szubsztrát komplexhez kötődik; ezért nem versenyez a hordozóval a kötőhelyen. Következésképpen mind a KM, mind a Vmax értékek csökkennek. Következésképpen az új Vmax kölcsönös értékének magasabb helyzetben kell lennie a tengelyen, mivel a frakció nagyobb lesz, amikor a nevező kisebb lesz. A KM új kölcsönös értéke balra tolódik, és a magyarázatnak hasonlónak kell lennie a versenygátlóéhoz. Ennek kettős kölcsönös telken történő bemutatásához a lejtés ugyanaz marad, mintha az enzim nem kötődik az inhibitorhoz, de az x-tengely elfogása csökken. A kettős reciprok plot enzim és anélkül versenyképtelen inhibitor lesz két párhuzamos vonalak.

nem kompetitív inhibitorok esetén az inhibitor kötődhet az enzimhez, mielőtt a szubsztrát kötődne a kötőhelyhez. Nem kell megvárnia, amíg az enzim enzim-szubsztrát komplexgé válik az enzimhez való kötődéshez. A gátlás a VMAX érték csökkenését okozza, míg a KM nem változik. Ez azt jelenti, hogy a -1/KM értéke ugyanaz marad a két vonal esetében, míg az 1/Vmax Új értéke magasabb az előzőhöz képest. Ennek kettős kölcsönös telken történő megmutatásához a Vmax csökkenése nagyobb lejtéssel növeli az y-elfogást.

Vélemény, hozzászólás?

Az e-mail-címet nem tesszük közzé. A kötelező mezőket * karakterrel jelöltük