Strukturní Biochemie/Enzym/Double-Vzájemné pozemku: Lineweaver Burk plote

Lineweaver-Burke spiknutí

double-vzájemné rovnice se získá tím, že vzájemné obou stranách Michaelis-Menten rovnice. Double-reciproční (také známý jako Lineweaver-Burk) děj je vytvořena vynesením inverzní počáteční rychlost (1/V0) jako funkce inverzní koncentrace substrátu (1/). Vmax lze přesně určit, a tak KM lze také určit s přesností, protože se vytvoří přímka. Sklon výsledné čáry je KM / Vmax, y-intercept je 1 / Vmax a X-intercept je -1 / KM. Pomocí Michaelis-Menten rovnice, Vmax je asymptota a může tedy být pouze přibližné a jako výsledek, KM, což je Vmax/2, nelze určit přesně. Tento graf je užitečným způsobem, jak určit různé inhibitory, jako jsou konkurenční, nekonkurenční a nekonkurenční.

kompetitivní Inhibitor

Pro konkurenční inhibitory, inhibitor soutěží se substrátem molekuly se váží na vazebné místo. V důsledku toho se KM zvýší bez změny hodnoty VMAX. To znamená, že dva grafy budou mít stejný y-intercept, jak je uvedeno níže. Nový x-intercept však může být docela nepolapitelný. U tohoto typu inhibitorů je zapotřebí vyšší koncentrace substrátu, aby byla obsazena polovina aktivních míst. Proto KM2 bude větší než KM1. To znamená vyšší vzájemnou hodnotu KM1 než hodnota KM2. X-intercept má však před sebou záporné znaménko, takže na grafu se musí pohybovat doprava vzhledem k předchozímu interceptu. Ukázat na dvojí vzájemný děj, sklon zvýší ukázat sílu vazby kompetitivní inhibitor. Zatímco sklon se zvyšuje s přítomností inhibitoru y-intercept zůstává stejný v přítomnosti a nepřítomnosti inhibitoru.

u nekonkurenčních inhibitorů se inhibitor váže pouze na komplex enzym-substrát; proto nekonkuruje substrátu pro vazebné místo. V důsledku toho se hodnoty KM I Vmax snižují. V důsledku toho by reciproční hodnota nového Vmax měla být ve vyšší poloze na ose, protože zlomek se zvětší, když se jmenovatel zmenší. Nová vzájemná hodnota KM se bude pohybovat doleva a vysvětlení by mělo být podobné vysvětlení konkurenčního inhibitoru. Chcete-li to ukázat na dvojitém vzájemném grafu, sklon zůstane stejný, jako kdyby enzym nebyl vázán na inhibitor, ale zachycení osy x se sníží. Dvojitý reciproční graf pro enzym s nekonkurenčním inhibitorem a bez něj budou dvě paralelní linie.

u nekonkurenčních inhibitorů se inhibitor může vázat na enzym dříve, než se substrát může vázat na vazebné místo. Nemusí čekat, až se enzym stane komplexem enzym-substrát, aby se vázal na enzym. Inhibice způsobí snížení hodnoty VMAX, zatímco KM není ovlivněna. To znamená, že hodnota -1 / KM zůstává stejná pro dva řádky, zatímco nová hodnota 1/Vmax je vyšší oproti předchozí. Chcete-li to ukázat na dvojitém vzájemném grafu, pokles Vmax zvýší y-intercept s větším sklonem.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna. Vyžadované informace jsou označeny *